胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿价格 7092
产品规格

1 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿

产品参数
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 1031.07 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,的caspases在凋亡中占有主导地位,FITC-C6-LEHD-FMK能提供简便灵敏的方法对活细胞中对的caspase-9进行检测。FITC-C6-LEVD-FMK在凋亡细胞中具有通透性,性和不可逆结合的caspase-9的特点,是带有FITC标记的特异性Caspase 9抑制剂。FITC标记能直接通过荧光显微镜,流式细胞仪或者荧光酶标仪测定的Caspase 9。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿。

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实验方案

操作方法

以下协议仅提供指导,应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物(50 µM)分析溶液:50 µL底物原液,100 µL DTT(1M),400 µL EDTA(100 mM),10 mL Tris Buffer(20 mM),pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合,并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光,或使用酶标仪监测吸光度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)在Hanks中稀释DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X渗透性半胱天冬酶底物(20 µM)分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合(来自步骤2.3),并在37°C,5%CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定(仅适用于#13470-13476)

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1:250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中(例如2 µL至500 µL细胞),并将细胞在37°C,5%CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Endoplasmic reticulum stress and trophic factor withdrawal activate distinct signaling cascades that induce glycogen synthase kinase-3 beta and a caspase-9-dependent apoptosis in cerebellar granule neurons
Authors: Brewster JL, Linseman DA, Bouchard RJ, Loucks FA, Precht TA, Esch EA, Heidenreich KA.
Journal: Mol Cell Neurosci (2006): 242

Enhanced 15-HPETE production during oxidant stress induces apoptosis of endothelial cells
Authors: Sordillo LM, Weaver JA, Cao YZ, Corl C, Sylte MJ, Mullarky IK.
Journal: Prostaglandins Other Lipid Mediat (2005): 19

P2X7 receptor-mediated apoptosis of human cervical epithelial cells
Authors: Wang Q, Wang L, Feng YH, Li X, Zeng R, Gorodeski GI.
Journal: Am J Physiol Cell Physiol (2004): C1349

Caspase activation during Haemophilus somnus lipooligosaccharide-mediated apoptosis of bovine endothelial cells
Authors: Sylte MJ, Leite FP, Kuckleburg CJ, Inzana TJ, Czuprynski CJ.
Journal: Microb Pathog (2003): 285

Induction of apoptosis by apicidin, a histone deacetylase inhibitor, via the activation of mitochondria-dependent caspase cascades in human Bcr-Abl-positive leukemia cells
Authors: Cheong JW, Chong SY, Kim JY, Eom JI, Jeung HK, Maeng HY, Lee ST, Min YH.
Journal: Clin Cancer Res (2003): 5018

Protein kinase Cdelta amplifies ceramide formation via mitochondrial signaling in prostate cancer cells
Authors: Sumitomo M, Ohba M, Asakuma J, Asano T, Kuroki T, Hayakawa M.
Journal: J Clin Invest (2002): 827

3-m-bromoacetylamino benzoic acid ethyl ester: a new cancericidal agent that activates the apoptotic pathway through caspase-9
Authors: Schlesinger M, Jiang JD, Roboz JP, Denner L, Ling YH, Holland JF, Bekesi JG.
Journal: Biochem Pharmacol (2000): 1693

Human malignant glioma therapy using anti-alpha(v)beta3 integrin agents
Authors: Chatterjee S, Matsumura A, Schradermeier J, Gillespie GY.
Journal: J Neurooncol (2000): 135

Phenylephrine protects neonatal rat cardiomyocytes from hypoxia and serum deprivation-induced apoptosis
Authors: Zhu H, McElwee-Witmer S, Perrone M, Clark KL, Zilberstein A.
Journal: Cell Death Differ (2000): 773

 

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产品名称 货号
胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 FITC-C6-DEVD-FMK 绿 Cat#13406

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝 CAS 292633-16-0-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝 CAS 292633-16-0价格 2111
产品规格

5 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝  CAS 292633-16-0

产品参数
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 711.72 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,Caspase 9是半胱氨酸蛋白酶家族中CED-3亚家族成员,在凋亡起始阶段占有必要地位。这些酶主要具有特异的保守性区域,并特异的切开识别位点后面的天冬氨酸残基。起始凋亡蛋白酶(例如caspases-8)效应蛋白酶,例如caspase-3或者-7。这些效应蛋白酶然后酶切细胞底物导致凋亡的形态学改变。AC-LHED-AMC是caspase-9选择性荧光底物。Caspase-9酶切水解特异性底物AC-LHED-AMC,导致释放AMC荧光集团,其激发波长是365nm,发射光波长为450nm。这个实验的准备试验缓冲液包含50nM MES,pH6.5,10%PEG8000, 0.1% CHAPS, 5 mM DTT, and 1 mM EDTA.。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物Ac-LEHD-AMC 蓝。

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实验方案

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 uL基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Structure-dependent induction of apoptosis by hepatotoxic pyrrolizidine alkaloids in the human hepatoma cell line HepaRG: Single versus repeated exposure
Authors: Julia Waizenegger, Albert Braeuning, Markus Templin, Alfonso Lampen, Stefanie Hessel-Pras
Journal: Food and Chemical Toxicology (2018)

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿-AAT Bioquest荧光染料

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胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿

产品参数
Ex (nm) 500 Em (nm) 522
分子量 1403.41 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,(Ac-LEHD)2-R110是Caspase 9的荧光底物。因为高纯的罗丹明110(R110)衍生底物被置于内酯的构型内,因此是无色的,也不发出荧光。在Caspase蛋白酶(天冬氨酸蛋白水解酶或胱冬肽酶)的作用下,切割R110上的多肽而获得具有强烈荧光的R110产物,该产物可在480nm(常见的荧光检测仪上都具有这种激发光源)处被激发后,在510nm-530 nm处用荧光法检测。R110衍生的Caspase底物可能是被广泛用于检测多种Caspase酶活性的底物中灵敏的荧光底物。我们的R110衍生底物是高纯度的,并保证经HPLC检测不出R110,因这些残留的R11可能会产生显著的本底干扰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物(Ac-LEHD)2-R110 绿。

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实验方案

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 L基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

pH-Assisted surface functionalization of selenium nanoparticles with curcumin to achieve enhanced cancer chemopreventive activity
Authors: Shaoxuan Yu, Yanru Wang, Wentao Zhang, Yuhuan Zhang, Wenxin Zhu, Yingnan Liu, Daohong Zhang, Jianlong Wang
Journal: RSC Advances (2016): 72213–72223

 

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1 mg

产品货号

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-LEHD-ProRed 620红

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Ex (nm) 532 Em (nm) 619
分子量 1865.70 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-LEHD-ProRed 620红是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,ProRed 蛋白酶底物无色,无荧光。ProRed 阻断蛋白酶裂解肽基被半胱氨酸蛋白酶产生强烈的红色荧光,可以在〜620 nm处的〜530 nm激发波长被监控到。 ProRed 衍生的胱天蛋白酶底物是敏感的红色指示剂,用于荧光及各种蛋白酶活性检测。 LEHD-ProRed 酶底物主要用于检测蛋白酶9。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 3/7荧光底物 Z-LEHD-ProRed 620红。

点击查看光谱

实验方案

样品实验方案

以下说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

1.使用AMC,AFC,pNA,R110和ProRed底物的一般溶液Caspase测定

1.1在DMSO中制备10mM储备溶液。

1.2制备2X半胱天冬酶底物(50μM)测定溶液,如下所示:

50 uL基质原液

100L DTT(1M)

400L EDTA(100 mM)

10mL Tris缓冲液(20mM),pH = 7.4

1.3将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤1.2)混合,并在室温下孵育溶液至少1小时。

1.4使用荧光酶标仪检测荧光,或使用吸光度酶标仪检测吸光度。

 

2.细胞Caspase检测使用细胞渗透FMK半胱天冬酶探针

2.1在DMSO中制备2-5mM储备溶液。

2.2根据需要对细胞进行处理。

2.3通过用20mM Hepes缓冲液(HHBS)稀释Hanks中的DMSO储备溶液(来自步骤2.1),制备2X可渗透的半胱天冬酶底物(20μM)测定溶液。

2.4用2X半胱天冬酶底物测定溶液(来自步骤2.3)混合等体积的处理细胞,并将细胞在37℃,5%CO 2培养箱中孵育至少1小时。

2.5用HHBS洗涤细胞至少一次。

2.6用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

3.细胞Caspase检测使用细胞渗透性FMK Caspase探针(仅适用于#13470-13476)

3.1通过向小瓶中加入50μLDMSO制备250X储备溶液。

3.2根据需要对细胞进行处理。

3.3将250 X DMSO储备溶液(来自步骤3.1)以1:250的比例(例如2 uL至500 uL细胞)添加到细胞溶液中,并将细胞在37°C,5%CO 2培养箱中孵育1 小时。

3.4用HHBS洗涤细胞至少一次。

3.5用流式细胞仪,荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

 

参考文献

Degenerin channel activation causes caspase-mediated protein degradation and mitochondrial dysfunction in adult C. elegans muscle
Authors: Christopher J Gaffney, Freya Shephard, Jeff Chu, David L Baillie, Ann Rose, Dumitru Constantin-Teodosiu, Paul L Greenhaff, Nathaniel J Szewczyk
Journal: Journal of Cachexia, Sarcopenia and Muscle (2015)

 

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