Nanobind UL library prep kit900-601-01


Nanobind UL library prep kit

简要描述:Nanobind UL library prep kit,产品型号:900-601-01 。
超长纳米孔测序。超高分子量DNA提取辅助试剂盒。

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

Nanobind UL library prep kit,产品型号:900-601-01 。

Nanobind UL library prep kit,描述:

高通量和超长读取(100 kb-1+Mb)现在齐头并进,可以成为您实验室的常客与Nanobind超长测序。该方法已被用于生成长的测序数据。我们在2020年1月以2.44 Mb的读取量打破了之前的2.3 Mb记录。几个月后,我们以290万的读取量打破了这一记录。最近,牛津纳米孔以他们自己的4.1 Mb的读取量打破了我们的记录。

最高的读长度和吞吐量组合

与以前的超长测序方法相比,这种新方法的吞吐量提高了10-100倍。在广泛的样本类型中,始终获得1-2+Mb的最长读取,50-100+kb的读取长度N50,以及10-20+Gb的MinION吞吐量和50-100+Gb的PromethION吞吐量。

此方法旨在100+kb和200+kb读取的数据量。虽然该方法可以用于生成超过200 kb的读取长度N50,但超长数据吞吐量实际上可以通过更温和的读取长度N50 (50-100 kb)。秘诀在于保持高毛孔占有率。

该方法

首先,使用适当的Nanobind试剂盒(CBB,植物核或组织)提取UHMW(50 kb1+Mb)DNA。我们开发了全新的UHMW DNA提取方案,从而降低了DNA的粘性,提高了测序吞吐量,甚至延长了读取长度。

每个Nanobind UL库准备套件配有一个UHMW DNA辅助套件,与适当的Nanobind套件一起用于UHMW DNA提取。

然后,将Nanobind UL文库准备试剂盒与Oxford Nanopore超长DNA测序试剂盒(SQK-ULK001)结合使用,制备UHMW DNA进行测序。基于转座酶的方法用于将测序适配器和马达蛋白添加到UHMW DNA中。ONT试剂盒包含所有酶和试剂。我们的工具包包含Nanobind磁盘和缓冲区执行反应清理。与磁性颗粒不同,我们的磁性Nanobind磁盘可以在不剪切的情况下快速纯化兆酶DNA,首先在提取中,然后在文库准备中。

与其他超长测序方法相比,这种新方法不使用快速测序试剂盒(SQK-RAD004)。与Oxford Nanopore合作,对提取、文库准备和测序进行了基础优化,以实现高孔隙占有率,从而大幅提高产量。它与MinION, GridION和PromethION兼容,并对核酸酶冲洗反应良好。

标准的Nanobind超长测序协议生成一个6倍的MinION库或3倍的PromethION库,该库被拆分并按顺序加载到相同的流式细胞上,通过核酸酶冲洗间隔以最大限度地提高吞吐量(每个流式细胞3次加载,每次24小时)。MinION/GridION/PromethION使用相同的协议。

该方案最初是在培养的细胞、细菌、人血和有核血液样本上开发的。从那时起,它已经扩展到动物组织和植物样本。改进读取长度和进一步扩大样本类型的工作正在进行中。

包括:

1.NAF无醇结合缓冲液

2.WAF无酒精洗涤缓冲液

3.EB +洗脱缓冲

4.6x Nanobind磁盘

每个套件可用于运行6个流单元,使用3X库。

还包括与适当的Nanobind试剂盒结合使用的UHMW DNA辅助试剂盒,以执行UHMW DNA提取。每个辅助套件包含:

1.10X 红细胞裂解缓冲液

2. 蛋白酶K

3.核糖核酸酶一

4.CLE3消化缓冲液

5.ULL裂解/结合缓冲液

6.CS消化补充剂

上海金畔生物科技有限公司

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Human Domain Antibody Library (DAb library)

Human Domain Antibody Library源自MRC Daniel Christ实验室, Human Domain Antibody Library明显优于Tomlinson I + J 文库,可以通过噬菌体展示技术产生针对任何目的抗原的抗体。该类抗体可用于ELISA, Western blotting, FACS, IHC等免疫学试验。该噬菌体文库已经在很多分子生物学实验室成功使用,可在大量不同的蛋白,多肽,小分子复合物中诱导出特异性抗体反应物。

噬菌体展示技术利用基因克隆技术将B细胞全套可变区基因克隆出来,组装到表达载体内并表达到噬菌体表面,并通过“吸附-洗脱-扩增”的富集过程,从中筛选特异性抗体的可变区基因。Human Domain Antibody构建在pR2(MYC VSV  标签)上,多元化的侧链在 CDR1、CDR2 和 CDR 3:H27 33、H35、H50、H52 H54、H94、H95-H100(a-k)、H101、H102。经过筛选后与突变的多样性体细胞共同作用使其成熟。该文库基于VH框架(V3-23/D47),抗原结合区域的多样性的引入通过PCR突变CDR1、CDR2和CDR3。此文库有以下优点:

· 产生结合剂到模型折叠抗原上,无冷却后抗原结合活性的重大损失。

· 抗体选择后,通过25次热变形循环,竞争抗耐性的嗜热蛋白如Taq酶,保持抗原结合活性。

· 在噬菌体中,所有组分可经受热诱导聚集反应。

以上提到的优点,可为诊断和治疗的研究与应用提供广泛领域,可以进一步实现较大化结合你感兴趣的抗原数量。

文库以下面形式提供:

· Phagemid antibody library (~3×10 9 )

· Helper phage KM13

· Host strain TG1Tr

· Optimised antibody expression strain HB2151

· Controls: anti-beta-galactosidase & anti-bovine ubiquitin antibodies

· Detailed protocol

Source Bioscience (Geneservice)与全球多个科研机构(如NIH、NKI、Sanger等)建立合作关系,拥有全球较大的cDNA、基因组、噬菌体展示、microRNA、siRNA、shRNA与MGC收藏库,涉及物种包括人、小鼠、大鼠、牛,以及各种模式动物如线虫、斑马鱼、果蝇、原鸡、爪蟾等,产品达1600多万种。Human Domain Antibody Library是Source Bioscience提供的较为成熟的一个文库,除此之外,还有Tomlinson I + J 文库,以及ATLAS scFV library。

更多产品可点击 Source Bioscience查询具体信息。

上海金畔生物科技有限公司成为美国Source Bioscience中国地区一级代理,双方携手为国内科研工作者提供物种齐全的克隆及文库,欢迎您来电咨询和申请。

The World’s Largest Commercial Clone Library

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• Over 20 million clones
•  Sequence verification availab
•  Plasmid preparation service
•  Rapid turnaround times

CLONE PORTFOLIO
• cDNA/ORF (IMAGE, MGC, FANTOM
EST, ORF)
• RNAi (Human miRNA, shRNAm,
MISSION siRNA, C. elegans RNAi)
• Antibody libraries (Human Single
fold scFv libraries I + J, Human Domain
antibody library (DAb), ATLAS ScFV)
• Synthetic genes (made to order)

Genomic
•     Human (CpG island, TilePath BAC,
minimal genomic clone set, BAC
(RPCI-11)
•     C.elegans (promoterome library,
fosmid library)
•     Chicken (BAC, CpG island)
•     Drosophilia cosmid
•     Fugu (BAC, cosmid)
•     Mouse (bMQ BAC, BAC (RPCI-23),
PAC, Cosmid (strain 129/ola)
•     Zebrafish BAC
•     Pig CpG Island

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