Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光 价格 4245
产品规格

100 Tests

产品货号

Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光

产品参数
Ex (nm) 509 Em (nm) 527
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于标记活细胞的试剂盒,对活细胞中的RNA分子进行检测和成像对于多种分子生物学程序重要,包括物理运输,遗传信息解释,基因表达调控和某些重要的生物催化作用。 在活细胞中染色RNA的主要挑战是DNA造成的干扰。 为了解决该困难,开发了新型绿色荧光染料作为RNA选择性探针。 AAT Bioquest的Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒包括StrandBrite RNA Green,因为它能特异性结合细胞中的RNA。 与用于体内RNA染色的商用SYTO®RNA Select染料相比,StrandBrite RNA Green显示出更亮的信号和对RNA的更好的选择性。 此外,该试剂盒可对活细胞和固定细胞中的RNA进行染色。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒。

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: 490 nm
Em: 520 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片组: FITC 滤波片组
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备细胞
2.添加StrandBrite RNA Green工作溶液
3.孵育30-60分钟
4.在Ex / Em = 490/520 nm(FITC滤光片组)的荧光显微镜下分析细胞

 

样品示例及操作

1.根据特定的诱导方案将细胞培养至适合成像的密度(约1-2×104个细胞/孔/ 96孔板)。

2.对于活细胞:将室温下用培养基或活细胞染色缓冲液(组分B)中稀释400倍的StrandBrite RNA Green(组分A)孵育细胞30-60分钟(100 µL /孔)。注意:25 µL StrandBrite RNA Green(组分A)足以容纳一个96孔板。避光并避免重复的冻融循环。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。有关详细信息,请参见图1。

3.对于固定细胞:在室温下用纯甲醇固定细胞1分钟,然后用PBS洗涤。将细胞浸入1%Triton-100中2分钟,然后用PBS洗涤两次。在室温下,用PBS中1X浓度的StrandBrite RNA Green(组分A)孵育细胞15-30分钟。注意:建议增加标记浓度或孵育时间,以使染料在细胞未充分染色的情况下积累。有关详细信息,请参见图1。

4.(可选)用PBS洗涤细胞1-2次,然后向每个孔中加入100 µL PBS。

5.使用荧光显微镜在Ex / Em = 490/520 nm(FITC通道)上监控荧光强度。

 

Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒 绿色荧光

图1. HeLa细胞中RNA染色的荧光图像。 (A)使用Cell Navigator 活细胞RNA成像试剂盒(绿色,目录号22630)对活细胞染色,并用Hoechst 33342(蓝色,目录号17530)复染。 (B)使用相同试剂盒将固定在甲醇中的细胞染色。 (C)染色后,将固定的HeLa细胞与0.5 mg / mL RNase在37ºC下孵育1小时。 RNase消化测试的图像表明StrandBrite RNA Green具有很高的选择性。 使用带有FITC滤光片的荧光显微镜测量绿色荧光信号。

 
 
 
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产品名称 货号
Cell Navigator 活细胞微管蛋白染色试剂盒 Cat#23170

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 绿色荧光 价格 4245
产品规格

100 Tests

产品货号

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 绿色荧光

产品参数
Ex (nm) 503 Em (nm) 511
分子量 N/A 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的内质网染色试剂盒,内质网(ER)是真核生物细胞中的一种细胞器,其形成扁平的,膜封闭的囊或称为池状的管状结构的互连网络。 ER的膜与外核膜连续。 ER在大多数类型的真核细胞中发生,但在红细胞和精子中不存在。 Cell Navigator 活细胞内质网(ER)染色试剂盒使用我们的ER Tracer Green作为ER标记物。 ER Tracer 绿色染料是一种细胞渗透性荧光染料,对ER具有高度选择性。 该染色剂由绿色荧光染料和ER组成,其在大多数细胞类型中选择性地结合ER。 对于某些细胞,ER Tracer Green可能无法选择性地与ER结合。 ER Tracer Green具有与FITC基本相同的光谱特性,使该试剂盒便于使用FITC滤光片组。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒。 

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: 490 nm
Em: 520 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片组: FITC 滤波片组
实验方案

样本分析方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.用ER Green 工作溶液在37ºC孵育细胞15-30分钟
3.在Ex / Em = 490 / 520nm(FITC滤光片组)下在荧光显微镜下分析细胞

溶液配制

1.储备溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
ER Green 原液(500X):
将20μLDMSO(组分C)加入到ER Green (组分A)的小瓶中并充分混合以制备500X ER Green 储备溶液。 注意:20μL的500X ER Green 原液足以容纳一个96孔板。 如果管子密封,未使用的500X ER Green 储备溶液可以在≤-20ºC下储存两周。 避光。

2.工作溶液配制

将20μL500XER Green 储备溶液加入10 mL活细胞染色缓冲液(组分B)中,充分混合,制成ER Green 工作溶液。 该ER Green 工作溶液在室温下稳定至少2小时。 避光。有关细胞样品制备的指南,请点击查看。

操作步骤

1.在细胞板中加入100μL/孔(96孔板)或50μL/孔(384孔板)的ER Green TM工作溶液。 用37℃的工作溶液孵育细胞15-30分钟,避光。 注意:ER探针的浓度根据具体应用而有所不同。 浓度高于工作溶液可能对细胞有毒。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.在每个孔中移除ER Green 工作溶液。 用物理相关缓冲液洗涤细胞三次。

3.染色后修复细胞(可选)。 用4%甲醛固定细胞5-10分钟。 用物理相关缓冲液洗涤细胞三次。

4.使用具有FITC滤光片组(Ex / Em = 490 / 520nm)的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

数据分析

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 绿色荧光

图1.使用具有FITC滤光片组的荧光显微镜在96孔黑壁透明底板中培养的HeLa细胞中内质网(ER)染色的荧光图像。 左:活细胞用ER-选择性探针ER Green (Cat#22635,Green),线粒体染料MitoLite Red FX600(Cat#22677,Red)和细胞核染色Hoechst 33342(Cat#17530,蓝色)染色。 右:用ER Green (Cat22635,Green)染色的活细胞用4%甲醛固定,并用F-肌动蛋白染料iFluor 594-鬼笔环肽(Cat#23122,红色)和细胞核染色DAPI(Cat#17507,蓝色)标记。)。

参考文献

DNA Transformer for Visualizing Endogenous RNA Dynamics in Live Cells
Authors: Ying Wan, Ninghao Zhu, Yi Lu, Pak Kin Wong
Journal: Analytical Chemistry (2019)

 

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产品名称 货号
Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 红色荧光 Cat#22636

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 红色荧光 价格 4245
产品规格

100 Tests

产品货号

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 588 Em (nm) 620
分子量 N/A 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒是美国AAT Bioquest生产的内质网染色试剂盒,内质网(ER)是真核生物细胞中的一种细胞器,其形成扁平的,膜封闭的囊或称为池状的管状结构的互连网络。 ER的膜与外核膜连续。 ER在大多数类型的真核细胞中发生,但在红细胞和精子中不存在。 Cell Navigator 活细胞内质网(ER)染色试剂盒使用我们的ER Tracer Green作为ER标记物。 ER Tracer 红色染色是一种细胞渗透性荧光染料,对ER具有高度选择性。 该染色剂由红色荧光染料和ER粘合剂组成,其在大多数细胞类型中选择性地结合ER。 对于某些细胞,ER Tracer Green可能无法选择性地与ER结合。 ER Tracer Red具有与Texas Red基本相同的光谱特性,使该试剂盒便于使用Texas Red滤波片组。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒。 

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: 590 nm
Em: 620 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片组: TRITC or Cy3 滤波片组
实验方案

样本分析方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.用ER Green red工作溶液在37ºC孵育细胞15-30分钟
3.在Ex / Em = 590 / 620nm(Texas Red滤光片组)下在荧光显微镜下分析细胞

溶液配制

1.储备溶液配制

        除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
ER Green 原液(500X):
将20μLDMSO(组分C)加入到ER red (组分A)的小瓶中并充分混合以制备500X ER red 储备溶液。 注意:20μL的500X ER red 原液足以容纳一个96孔板。 如果管子密封,未使用的500X ER red 储备溶液可以在≤-20ºC下储存两周。 避光。

2.工作溶液配制

将20μL500XER red 储备溶液加入10 mL活细胞染色缓冲液(组分B)中,充分混合,制成ER red 工作溶液。 该ER red 工作溶液在室温下稳定至少2小时。 避光。有关细胞样品制备的指南,请点击查看。

操作步骤

1.在细胞板中加入100μL/孔(96孔板)或50μL/孔(384孔板)的ER red 工作溶液。 用37℃的工作溶液孵育细胞15-30分钟,避光。 注意:ER探针的浓度根据具体应用而有所不同。 浓度高于工作溶液可能对细胞有毒。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.在每个孔中移除ER red 工作溶液。 用物理相关缓冲液洗涤细胞三次。

3.染色后修复细胞(可选)。 用4%甲醛固定细胞5-10分钟。 用物理相关缓冲液洗涤细胞三次。

4.使用具有Texas Red滤光片组(Ex / Em = 590 / 620nm)的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号。

数据分析

Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 红色荧光

图1.使用具有TRITC滤光片组的荧光显微镜在96孔黑壁透明底板中培养的HeLa细胞中内质网(ER)染色的荧光图像。 左:活细胞用ER-选择性探针ER Red (Cat#22636,Red),线粒体染料MitoLite Green(Cat#22675,Green)和细胞核染色Hoechst 33342(Cat#17530,蓝色)染色。 右:用ER Red (Cat#22636,红色)染色的活细胞用4%甲醛固定,然后用F-肌动蛋白染料iFluor 488-鬼笔环肽(Cat#22661,Green)和细胞核染色DAPI(Cat#17507)标记。蓝色)。

参考文献

Teleost-Specific TLR19 Localizes to Endosome, Recognizes dsRNA, Recruits TRIF, Triggers both IFN and NF-$kappa$B Pathways, and Protects Cells from Grass Carp Reovirus Infection
Authors: Jianfei Ji, Youliang Rao, Quanyuan Wan, Zhiwei Liao, Jianguo Su
Journal: The Journal of Immunology (2018): 573–585

 

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产品名称 货号
Cell Navigator 活细胞内质网染色试剂盒 绿色荧光 Cat#22635

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发价格 2823
产品规格

500 Tests

产品货号

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em = 405 / 520nm处以大斯托克斯位移的绿色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂,一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被困在溶酶体内。进入溶酶体后,其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: 405 nm
Em: 480 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
通道: Violet 通道
实验方案

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 405 / 480nm(紫外滤光片组)处进行分析

 

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1解冻 Lysolite VLG26(组分A)至室温。

1.2通过将20μLLysolite VLG26(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μLLysolite VLG26(组分A)就足够了。 将未使用的Lysolite VLG26(组分A)等分并储存在<-20℃。 避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞:

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Violet滤光片组(Ex / Em = 405 / 480nm)的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,然后加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Violet滤光片组(Ex / Em = 405 / 480nm)的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色(见步骤2.1)。

 Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 405nm激发

图1.使用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色的U2OS细胞图像使用Costar黑色96孔板进行405 nm激发的绿色荧光

 

参考文献

Increasing Uptake of Silica Nanoparticles with Electroporation: From Cellular Characterization to Potential Applications
Authors: Erick Phonesouk, Séverine Lechevallier, Audrey Ferrand, Marie-Pierre Rols, Christine Bezombes, Marc Verelst, Muriel Golzio
Journal: Materials (2019): 179

Clathrin-mediated endocytosis is a candidate entry sorting mechanism for Bombyx mori cypovirus
Authors: Fei Chen, Liyuan Zhu, Yiling Zhang, Dhiraj Kumar, Guangli Cao, Xiaolong Hu, Zi Liang, Sulan Kuang, Renyu Xue, Chengliang Gong
Journal: Scientific reports (2018): 7268

Staphylococcus aureus from atopic dermatitis skin accumulates in the lysosomes of keratinocytes with induction of IL-1α secretion via TLR 9
Authors: Masaya Moriwaki, Kazumasa Iwamoto, Yoshie Niitsu, Ayako Matsushima, Yuhki Yanase, Junzo Hisatsune, Motoyuki Sugai, Michihiro Hide
Journal: Allergy (2018)

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光价格 2823
产品规格

500 Tests

产品货号

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光

产品参数
Ex (nm) 636 Em (nm) 651
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =630/650nm处以大斯托克斯位移的近红外荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂,一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被困在溶酶体内。进入溶酶体后,其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该套件提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: 630 nm
Em: 650 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
通道: Cy5 通道
实验方案

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 630 / 650nm(Cy5滤光片组)处进行分析

 

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1解冻LysoBrite NIR(组分A)至室温。

1.2通过将20μLLysoBrite NIR(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μLLysoBrite NIR(组分A)就足够了。 将未使用的LysoBrite NIR(组分A)等分并储存在<-20℃。 避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞:

2.1对于贴壁细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Cy5滤光片的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,然后加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Cy5滤光器的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色(见步骤2.1)。

 Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 近红外荧光

图1.使用具有Cy5过滤器组的Olympus荧光显微镜在Costar黑色96孔板中用Cell Navigator TM溶酶体染色试剂盒染色的Hela细胞的图像。

 

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光价格 2111
产品规格

500 Tests

产品货号

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒    蓝色荧光

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光 是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =350/440nm处以大斯托克斯位移的蓝色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂,一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被困在溶酶体内。进入溶酶体后,其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该套件提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: DAPI 滤波片组
Em: DAPI 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
通道: DAPI 通道
实验方案

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 360 / 445nm(DAPI滤光片组)处进行分析

 

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1解冻LysoBrite Blue(组分A)至室温。

1.2通过将20μLLysoBrite Blue(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μLLysoBrite NIR(组分A)就足够了。 将未使用的LysoBrite Blue(组分A)等分并储存在<-20℃。 避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

 

2.准备和染色细胞:

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Dapi过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,然后加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有Dapi过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色(见步骤2.1)。

 Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒    蓝色荧光

图1.使用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色的U2OS细胞图像* Costar黑色96孔板中的蓝色荧光*

 

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 Cat#22658
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 Cat#22659
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22656

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光价格 2111
产品规格

500 Tests

产品货号

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光

产品参数
Ex (nm) 501 Em (nm) 510
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =445/503nm处以大斯托克斯位移的绿色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂,一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被困在溶酶体内。进入溶酶体后,其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该套件提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 445 / 503nm处进行分析

 

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1解冻 Lysolite Green(组分A)至室温。

1.2通过将20μLLysolite Green(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μLLysolite Green(组分A)就足够了。 将未使用的Lysolite Green(组分A)等分并储存在<-20℃。 避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞:

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有FITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,然后加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有FITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色(见步骤2.1)。

 Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光

图1.使用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色的U2OS细胞图像* Costar黑色96孔板中的绿色荧光*

 

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

 

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产品名称 货号
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 Cat#22658
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 Cat#22659
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光 Cat#22655

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 橙色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 橙色荧光 价格 2111
产品规格

500 Tests

产品货号

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒  橙色荧光

产品参数
Ex (nm) 543 Em (nm) 565
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 橙色荧光 是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =542/556nm处以大斯托克斯位移的橙色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。溶致指示剂,一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被困在溶酶体内。进入溶酶体后,其荧光显着增强。这一关键特征显着降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该套件提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 橙色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

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适用仪器


荧光显微镜  
Ex: TRITC 滤波片组
Em: TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

分析方案

概述

准备细胞

添加染料工作溶液

在37°C孵育30分钟至2小时

在荧光显微镜下Ex / Em = 542 / 556nm处进行分析

 

操作方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1解冻 Lysolite Orange(组分A)至室温。

1.2通过将20μLLysolite Orange(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μLLysolite Orange(组分A)就足够了。 将未使用的Lysolite Orange(组分A)等分并储存在<-20℃。 避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光溶酶体指示剂的浓度根据具体应用而变化。 可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

 

2.准备和染色细胞:

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色壁/透明底板(100μL/孔/ 96孔板)中或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(如100μL/孔/ 96孔板)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1,000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热的生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,然后加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37℃,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色(见步骤2.1)。

 

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 Cat#22658
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 Cat#22659
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22656

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 价格 2111
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500 Tests

产品货号

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 576 Em (nm) 596
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法和时间背景。

该特定试剂盒设计用于在Ex / Em =575/597nm处以大斯托克斯位移的红色荧光标记活细胞的溶酶体。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可能通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中。该指示剂中的溶质,是一种疏水性化合物,很容易渗透到完整的活细胞,并被保留在溶酶体内一段时间。进入溶酶体后,其荧光显著增强。这一关键特征显著降低了其染色背景,使其可用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒提供所有必要组件。 它适用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: TRITC 滤波片组
Em: TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

试验方案

  1. 准备细胞
  2. 添加染料工作溶液
  3. 在37°C孵育30分钟至2小时
  4. 在荧光显微镜下Ex / Em = 575 / 597nm处进行分析

注意:1)实验前,取出转染试剂进行室温冻结。

 

样品示例及使用方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1  取出试剂盒中A、B组分,室温避光静置5-10min。

1.2  移取20μLLysoBrite Red(组分A),用10mL活细胞染色缓冲液(组分B)进行稀释,制备染料工作液。

注意:1) 20μL的500XLysoBrite Red (组分A)足够完成一个96孔板,根据要求分装并储存未使用的500XLysoBrite Red(组分A),避免反复冻融。

        2)荧光溶酶体指示剂的浓度根据实际应用而改变,可以根据探针的渗透性对细胞类型、细胞或组织的染色条件进行调整。

 

2.细胞染色:

2.1对于贴壁细胞:

在96黑色/透明微孔板(100μL/孔/ 96孔板)或装有适当培养基内的培养皿的盖玻片上培养细胞,当细胞达到所需的汇合时,在96孔板或培养皿内加入等量的LysoBrite Red工作液,在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟,用预温(37°C) Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HBSS)或自配的缓冲液清洗细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔,再使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞,使之带红色荧光(Ex/Em = 575/600 nm)。

注意:1)如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。

 

2.2对于悬浮细胞:

向细胞中加入等量的LysoBrite Red工作液。在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟,用预温(37°C) Hanks和20 mM Hepes缓冲液(HBSS)或自配的缓冲液清洗细胞两次,用HBSS或生长培养基填充细胞孔,再使用配有TRITC过滤器组的荧光显微镜观察细胞,使之带红色荧光(Ex/Em = 575/600 nm)。

注意:  1)如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。

         2)悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色。

 

示例数据分析及图示

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光

图一:在Costar黑色透明底96孔板中用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒染色Hela细胞的荧光成像结果。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 红色荧光

图二:HeLa细胞分别用A和B,置于Costar黑壁/透明底96孔板中染色后的荧光成像结果,在0秒和120秒的曝光时间下,使用Olympus荧光显微镜对信号进行比较。A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22658)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22659)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

参考文献 

Visualising the dynamics of live pancreatic microtumours self-organised through cell-in-cell invasion
Authors: Yukiko Miyatake, Kaori Kuribayashi-Shigetomi, Yusuke Ohta, Shunji Ikeshita, Agus Subagyo, Kazuhisa Sueoka, Akira Kakugo, Maho Amano, Toshiyuki Takahashi, Takaharu Okajima
Journal: Scientific reports (2018): 14054

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

 

相关产品

产品名称 货号
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 Cat#22659
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 绿色荧光 Cat#22656
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 蓝色荧光 Cat#22655

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光价格 2111
产品规格

500 Tests

产品货号

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光

产品参数
Ex (nm) 597 Em (nm) 619
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。该试剂盒使用专有的溶解性染料,可以通过溶酶体pH梯度选择性地积聚在溶酶体中,该指示剂的溶质是一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞,并被保留在溶酶体内,进入溶酶体后,其荧光显着增强,这一关键特征显着降低了其染色背景。适用于多种不同类型的研究中包括细胞粘附、趋化性、多药耐药性、细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒提供所有的必需组分和细胞标记方法,适用于增殖和非增殖细胞,可用于悬浮细胞和贴壁细胞。LysoBrite染料的性能明显优于同等的LysoTracker染料(来自Invitrogen)。LysoBrite染料可以在活细胞中停留一周以上,对细胞的毒性极小,而LysoTracker染料只能使用几个小时,LysoBrite染料可以存活几代细胞。此外,LysoBrite染料比LysoTracker染料具有更高的光稳定性,金畔生物是为您提供优质的Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒。Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光 是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Texas Red 滤波片组
Em: Texas Red  滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

试验方案

  1. 准备细胞
  2. 添加LysoBriteDeep Red染料工作溶液
  3. 在37°C孵育30分钟至60分钟
  4. 添加染色缓冲液
  5. 室温孵育30分钟
  6. 在荧光显微镜下Ex/Em =590/620nm(Texas Red滤光片组)处进行分析

注意:1)实验前,取出试剂盒进行室温冻结。

 

样品示例及使用方法

1.准备溶酶体染色溶液:

1.1  取出试剂盒中A、B、C组分,室温避光静置5-10min。

1.2  移取10μL LysoBrite Deep Red(组分A),用5mL细胞染色缓冲液(组分B)进行稀释,制备染料工作液。

注意:1) 10μL的500X LysoBrite Deep Red(组分A)足够完成一个96孔板,根据要求分装并储存未使用的500X LysoBrite Deep Red(组分A),避免反复冻融。

2)荧光溶酶体指示剂的浓度根据实际应用而改变,可以根据探针的渗透性对细胞类型、细胞或组织的染色条件进行调整。

 

2.细胞染色:

  • 对于贴壁细胞:

在96孔黑色墙壁/透明底板(50μL/孔/ 96孔板)或装有适当培养基内的培养皿的盖玻片上培养细胞,当细胞达到所需的汇合时,在96孔板或培养皿内加入1/2的LysoBrite Deep Red工作液,在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟至60分钟,将(50 µL /孔/96孔板)的染色缓冲液B(组分C)加入LysoBrite Deep Red工作溶液板中,在室温下孵育15-30分钟。再使用配有Texas Red 滤片组的荧光显微镜观察细胞,使之带深红色荧光(Ex/Em = 590/620 nm)。

注意:1)LysoBrite Deep Red对细胞的毒性很小或没有,它可以用于细胞跟踪。为了进行细胞跟踪,可跳过添加染色缓冲液B的步骤,只需将染料工作液替换为生长培养基,然后在荧光显微镜下观察即可。如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。

 

  • 对于悬浮细胞:

在1000rpm条件下离心培养液5分钟,得到细胞沉淀并弃去上清液,在预热(37℃)生长培养基例如(100 µL /管)中轻轻重悬细胞沉淀,然后添加1/2体积(50 µL /管)LysoBrite Deep Red工作溶液。在37℃、5%CO2条件下培养箱中孵育30分钟至60分钟,将(50 µL /孔/96孔板)的染色缓冲液B(组分C)加入LysoBrite Deep Red工作溶液板中,在室温下孵育15-30分钟。再使用配有Texas Red 滤片组的荧光显微镜观察细胞,使之带深红色荧光(Ex/Em = 590/620 nm)。

注意:  1)LysoBrite Deep Red对细胞的毒性很小或没有。它可以用于细胞跟踪。为了进行细胞跟踪,可跳过添加染色缓冲液B的步骤,只需将染料工作液替换为生长培养基,然后在荧光显微镜下观察即可。如果细胞看起来没有充分染色,建议适当增加染料浓度或孵育时间。 

        2)悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为贴壁细胞染色。

 

示例数据分析及图示

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光

图一:在Costar黑色透明底96孔板中用Cell Navigator 溶酶体染色试剂盒LysoBrite Deep Red染色Hela细胞的荧光成像结果。

Cell Navigator 溶酶体标记试剂盒 深红色荧光

图二:HeLa细胞分别用A和B,置于Costar黑壁/透明底96孔板中染色后的荧光成像结果,在0秒和120秒的曝光时间下,使用Olympus荧光显微镜对信号进行比较。

A: Cell Navigator溶酶体染色试剂盒(Cat# 22659)、B: LysoTracker®Red DND-99(来自Invitrogen公司)。

 

参考文献

A Triple-Fluorophore Labeled Nucleic Acid pH Nanosensor to Investigate Non-Viral Gene Delivery
Authors: David R Wilson, Denis Routkevitch, Yuan Rui, Arman Mosenia, Karl J Wahlin, Alfredo Quinones-Hinojosa, Donald J Zack, Jordan J Green
Journal: Molecular Therapy (2017)

Silica-based nanoparticles as bi-functional and bi-modal imaging contrast agents
Authors: Séverine Lechevallier, Robert Mauricot, Hélène Gros-Dagnac, Sylviane Chevreux, Gilles Lemercier, Erick Phonesouk, Muriel Golzio, Marc Verelst
Journal: ChemPlusChem (2017)

Decidua-derived mesenchymal stem cells as carriers of mesoporous silica nanoparticles. In vitro and in vivo evaluation on mammary tumors
Authors: Juan L Paris, Paz de la Torre, Miguel Manzano, M Victoria Cabanas, Ana I Flores, María Vallet-Regí
Journal: Acta biomaterialia (2016): 275–282

Rhodamine bound maghemite as a long-term dual imaging nanoprobe of adipose tissue-derived mesenchymal stromal cells
Authors: Vratislav Cmiel, Josef Skopalik, Katerina Polakova, Jan Solar, Marketa Havrdova, David Milde, Ivan Justan, {cmiel2016rhodamine Magro
Journal: European Biophysics Journal (2016): 1–12

Endocytosed β2-microglobulin amyloid fibrils induce necrosis and apoptosis of rabbit synovial fibroblasts by disrupting endosomal/lysosomal membranes: a novel mechanism on the cytotoxicity of amyloid fibrils
Authors: Tadakazu Okoshi, Itaru Yamaguchi, Daisaku Ozawa, Kazuhiro Hasegawa, Hironobu Naiki
Journal: PloS one (2015): e0139330

Fluorescence Imaging of siRNA Delivery by Peptide Nucleic Acid-based Probe
Authors: Takaya Sato, Yusuke Sato, Kenta Iwai, Shusuke Kuge, Norio Teramae, Seiichi Nishizawa
Journal: Analytical Sciences (2015): 315–320

The consideration of indolicidin modification to balance its hemocompatibility and delivery efficiency
Authors: Ching-Wei Tsai, Wei-Wen Hu, Chih-I Liu, Ruoh-Chyu Ruaan, Bing-Chang Tsai, Shiow-Lian Catherine Jin, Yung Chang, Wen-Yih Chen
Journal: International journal of pharmaceutics (2015): 498–505

A monitoring method for Atg4 activation in living cells using peptide-conjugated polymeric nanoparticles
Authors: Kyung-mi Choi, Hae Yun Nam, Jin Hee Na, Seong Who Kim, Sang Yoon Kim, Kwangmeyung Kim, Ick Chan Kwon, Hyung Jun Ahn
Journal: Autophagy (2011): 1052–1062

 

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Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 蓝色荧光价格 2823
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500 Tests

产品货号

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 蓝色荧光

产品参数
Ex (nm) 345 Em (nm) 450
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法。

该特定试剂盒设计用于标记蓝色荧光中固定细胞的F-肌动蛋白。该试剂盒使用蓝色荧光鬼笔环肽缀合物,其选择性结合F-肌动蛋白。 鬼笔环肽缀合物具有Ex / Em = 350 / 450nm,与大多数荧光显微镜附带的DAPI滤光片组相容。 它是一种高亲和力探针,用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片,细胞培养或无细胞实验中的F-肌动蛋白。Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是由美国AAT Bioquest 研发的。

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: 350 nm
Em: 450nm 
推荐孔板: 黑色透明底板
推荐通道: DAPI 通道
实验方案

分析方案

概述

准备样品(微孔板孔)

从板上取下液体加入100μL/孔的iFluor 350-Phalloidin溶液

在室温下染色细胞15到60分钟

洗涤细胞

在Ex / Em = 350 / 450nm下在显微镜下观察样品

 

操作方法

1.准备1X iFluor 350-鬼笔环肽工作溶液:

将10μL的iFluor 350-鬼笔环肽(组分A)加入10mL标记缓冲液(组分B)中。

注1:未使用的iFluor 350-鬼笔环肽原液(组分A)应等分并保存在-20℃,避光。

注2:不同的细胞类型可能染色不同。应相应地制备iFluor 350-鬼笔环肽工作溶液的浓度。

 

2.染色细胞:

2.1执行甲醛固定。在室温下用3.0-4.0%甲醛的PBS孵育细胞10-30分钟。

注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。

2.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。用PBS冲洗细胞2-3次。

2.4将100μL/孔(96孔板)的1X iFluor™350-鬼笔环肽工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2或2.3),并在室温下染色细胞15至60分钟。

2.5用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以去除多余的染料,然后使用DAPI通道进行板密封和成像。

 Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 蓝色荧光

图1.用甲醛固定并用Cell Navigator F-肌动蛋白标记试剂盒染色的CPA细胞的图像*在Costar黑色96孔板中的蓝色荧光* A:用1X iFluor 350-鬼笔环肽标记细胞仅30分钟。 B:用鬼笔环肽处理细胞10分钟,然后用1X iFluor 350-鬼笔环肽染色30分钟。

 

试剂应用文献

Mussel-inspired conductive nanofibrous membranes repair myocardial infarction by enhancing cardiac function and revascularization

Authors: Yutong He, Genlan Ye, Chen Song, Chuangkun Li, Weirong Xiong, Lei Yu, Xiaozhong Qiu, Leyu Wang
Journal: Theranostics. 2018; 8(18): 5159–5177.

 

参考文献

Porous Li-containing biphasic calcium phosphate scaffolds fabricated by three-dimensional plotting for bone repair
Authors: Xiaoheng Guo, Huichang Gao, Xiao Liu, Jingjing Diao, Xuetao Shi, Naru Zhao, Yingjun Wang
Journal: RSC Advances (2017): 34508–34516

Preparation, characterization and in vitro cell performance of anti-washout calcium phosphate cement modified by sodium polyacrylate
Authors: Xingmei Li, Fupo He, Jiandong Ye
Journal: RSC Advances (2017): 32842–32849

miR-29b-Loaded Gold Nanoparticles Targeting to the Endoplasmic Reticulum for Synergistic Promotion of Osteogenic Differentiation
Authors: Ting Pan, Wenjing Song, Huichang Gao, Tianjie Li, Xiaodong Cao, Shizhen Zhong, Yingjun Wang
Journal: ACS Applied Materials & Interfaces (2016): 19217–19227

Osteogenic and tenogenic induction of hBMSCs by integrated nanofibrous scaffold with chemical and structural mimic to bone-ligament connection
Authors: Zifeng Lin, Xiujuan Zhao, Si Chen, Chang Du
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2016)

The stimulation of the differentiation of pheochromocytoma (PC12-L) cells into neuron-like cells by electrically conductive nanofibre mesh
Authors: Huishang Yang, Guanglin Zhu, Yicheng Huang, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Applied Materials Today (2016): 215–222

Distinct mechanical behavior of HEK293 cells in adherent and suspended states
Authors: Seyed Mohammad Ali Haghparast, Takanori Kihara, Jun Miyake
Journal: PeerJ (2015): e1131

The preparation and characterization of polycaprolactone/graphene oxide biocomposite nanofiber scaffolds and their application for directing cell behaviors
Authors: Juqing Song, Huichang Gao, Guanglin Zhu, Xiaodong Cao, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Carbon (2015): 1039–1050

Actin-based biomechanical features of suspended normal and cancer cells
Authors: Seyed Mohammad Ali Haghparast, Takanori Kihara, Yuji Shimizu, Shunsuke Yuba, Jun Miyake
Journal: Journal of bioscience and bioengineering (2013): 380–385

 

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Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 绿色荧光 价格 2823
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500 Tests

产品货号

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 绿色荧光

产品参数
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是一套荧光成像工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体,细胞核等。活细胞区的选择性标记为研究空间细胞事件提供了一种强大的方法。

该特定试剂盒设计用于标记具有绿色荧光的固定细胞中的F-肌动蛋白。该试剂盒使用绿色荧光鬼笔环肽缀合物,其选择性结合F-肌动蛋白。该绿色荧光鬼笔环肽缀合物是F-肌动蛋白的高亲和力探针。当以纳摩尔浓度使用时,鬼笔环肽是用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片,细胞培养物或无细胞实验中的F-肌动蛋白的方便探针。 该试剂盒为所有必需组件提供优化的染色方案,该方案功能强大,只需很少的手动操作时间。它是保存特定细胞荧光图像的绝佳工具。鬼笔环肽缀合物具有与FITC类似的光谱性质(Ex / Em = 500 / 520nm)。它也可以用于使用FITC滤光片(Ex / Em = 490 / 525nm)的荧光显微镜成像。Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品分析 

概述

准备样品(微孔板孔)从板上取下液体

加入100μL/孔的iFluor 488-鬼笔环肽溶液

在室温下染色细胞15到60分钟洗涤细胞

在Ex / Em = 488 / 520nm下在显微镜下检查样品

注意:打开前将所有组件加热至室温。

 

操作步骤

1.准备1X iFluor 488-鬼笔环肽工作溶液:

将10μL的iFluor 488-鬼笔环肽(组分A)加入10mL标记缓冲液(组分B)中。

注意1:未使用的1X iFluor 488-鬼笔环肽原液应等分并保存在-20 ℃。避光。

注意2:不同的细胞类型可能染色不同。 应相应地制备iFluor 488-鬼笔环肽工作溶液的浓度。

 

2.染色细胞:

2.1执行甲醛固定。 在室温下用3.0-4.0%甲醛的PBS孵育细胞10-30分钟。

注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。

2.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。

2.4将100μL/孔(96孔板)的iFluor 488-鬼笔环肽工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2或2.3),并在室温下将细胞染色15至60分钟。

2.5用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以去除多余的染料,然后使用FITC通道进行板密封和成像。

 

试剂应用文献

Mussel-inspired conductive nanofibrous membranes repair myocardial infarction by enhancing cardiac function and revascularization

Authors: Yutong He, Genlan Ye, Chen Song, Chuangkun Li, Weirong Xiong, Lei Yu, Xiaozhong Qiu, Leyu Wang
Journal: Theranostics. 2018; 8(18): 5159–5177.

 

参考文献

Modification of honeycomb bioceramic scaffolds for bone regeneration under the condition of excessive bone resorption
Authors: Fupo He, Teliang Lu, Xibo Fang, Ye Tian, Yanhui Li, Fei Zuo, Jiandong Ye
Journal: Journal of Biomedical Materials Research Part A (2019)

Injectable alendronate-functionalized GelMA hydrogels for mineralization and osteogenesis
Authors: Lei Liu, Xiaoyu Li, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: RSC Advances (2018): 22764–22776

Origami meets electrospinning: a new strategy for 3D nanofiber scaffolds
Authors: Juqing Song, Guanglin Zhu, Huichang Gao, Lin Wang, Nanying Li, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Bio-Design and Manufacturing (2018): 1–11

Study on MgxSr3-x (PO4) 2 bioceramics as potential bone grafts
Authors: Fupo He, Teliang Lu, Xibo Fang, Chao Qiu, Ye Tian, Yanhui Li, Fei Zuo, Jiandong Ye
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2018)

Tanshinone IIA attenuates osteoclastogenesis in ovariectomized mice by inactivating NF-kB and Akt signaling pathways
Authors: Li Cheng, Shengyuan Zhou, Yin Zhao, Yanqing Sun, Zheng Xu, Bo Yuan, Xiongsheng Chen
Journal: American Journal of Translational Research (2018): 1457

Porous Li-containing biphasic calcium phosphate scaffolds fabricated by three-dimensional plotting for bone repair
Authors: Xiaoheng Guo, Huichang Gao, Xiao Liu, Jingjing Diao, Xuetao Shi, Naru Zhao, Yingjun Wang
Journal: RSC Advances (2017): 34508–34516

Preparation, characterization and in vitro cell performance of anti-washout calcium phosphate cement modified by sodium polyacrylate
Authors: Xingmei Li, Fupo He, Jiandong Ye
Journal: RSC Advances (2017): 32842–32849

miR-29b-Loaded Gold Nanoparticles Targeting to the Endoplasmic Reticulum for Synergistic Promotion of Osteogenic Differentiation
Authors: Ting Pan, Wenjing Song, Huichang Gao, Tianjie Li, Xiaodong Cao, Shizhen Zhong, Yingjun Wang
Journal: ACS Applied Materials & Interfaces (2016): 19217–19227

Osteogenic and tenogenic induction of hBMSCs by integrated nanofibrous scaffold with chemical and structural mimic to bone-ligament connection
Authors: Zifeng Lin, Xiujuan Zhao, Si Chen, Chang Du
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2016)

The stimulation of the differentiation of pheochromocytoma (PC12-L) cells into neuron-like cells by electrically conductive nanofibre mesh
Authors: Huishang Yang, Guanglin Zhu, Yicheng Huang, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Applied Materials Today (2016): 215–222

 

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产品名称 货号
Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 红色荧光 Cat#22664
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Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 橙色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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产品规格

500 Tests

产品货号

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 橙色荧光

产品参数
Ex (nm) 541 Em (nm) 557
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是一套荧光工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体和细胞核等。活细胞区的选择性标记提供了一种研究空间细胞事件的有效方法。

该特定试剂盒用于标记橙色荧光中固定细胞的F-肌动蛋白。该试剂盒使用橙色荧光鬼笔环肽缀合物,其选择性结合F-肌动蛋白。橙色荧光鬼笔环肽缀合物具有Ex / Em = 550 / 575nm。 缀合物对荧光成像也具有良好的光稳定性。 它是一种高亲和力探针,用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片,细胞培养或无细胞实验中的F-肌动蛋白。Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是美国AAT Bioquest 研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: TRITC 滤波片组
Em: TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品分析 

概述

准备样品(微孔板孔)从板上取下液体

加入100μL/孔的iFluor 546-鬼笔环肽溶液

在室温下染色细胞15到60分钟洗涤细胞

使用TRITC通道在显微镜下观察样品(Ex / Em = 550/575 nm)

注意:打开前将所有组件加热至室温

 

操作步骤

1.准备1X iFluor 546-鬼笔环肽工作溶液:

将10μL的iFluor 546-鬼笔环肽(组分A)加入10mL标记缓冲液(组分B)中。

注意1:未使用的1X iFluor 546-鬼笔环肽原液应等分并保存在-20 ℃,避光。

注意2:不同的细胞类型可能染色不同。 应相应地制备iFluor 546-鬼笔环肽工作溶液的浓度。

 

2.染色细胞:

2.1执行甲醛固定。 在室温下用3.0-4.0%甲醛的PBS孵育细胞10-30分钟。

注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。

2.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。

2.4将100μL/孔(96孔板)的iFluor 546-鬼笔环肽工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2或2.3),并在室温下将细胞染色15至60分钟。

2.5用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以去除多余的染料,然后使用TRITC通道进行板密封和成像。

 Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 橙色荧光

        图1.用甲醛固定并用Cell Navigator F-肌动蛋白标记试剂盒染色的CPA细胞的图像*在Costar黑色96孔板中的橙色荧光* A:用1X iFluor 546-鬼笔环肽标记细胞仅30分钟。 B:用鬼笔环肽处理细胞10分钟,然后用1X iFluor 546-鬼笔环肽染色30分钟。

 

试剂应用文献

Mussel-inspired conductive nanofibrous membranes repair myocardial infarction by enhancing cardiac function and revascularization

Authors: Yutong He, Genlan Ye, Chen Song, Chuangkun Li, Weirong Xiong, Lei Yu, Xiaozhong Qiu, Leyu Wang
Journal: Theranostics. 2018; 8(18): 5159–5177.

 

参考文献

Porous Li-containing biphasic calcium phosphate scaffolds fabricated by three-dimensional plotting for bone repair
Authors: Xiaoheng Guo, Huichang Gao, Xiao Liu, Jingjing Diao, Xuetao Shi, Naru Zhao, Yingjun Wang
Journal: RSC Advances (2017): 34508–34516

Preparation, characterization and in vitro cell performance of anti-washout calcium phosphate cement modified by sodium polyacrylate
Authors: Xingmei Li, Fupo He, Jiandong Ye
Journal: RSC Advances (2017): 32842–32849

miR-29b-Loaded Gold Nanoparticles Targeting to the Endoplasmic Reticulum for Synergistic Promotion of Osteogenic Differentiation
Authors: Ting Pan, Wenjing Song, Huichang Gao, Tianjie Li, Xiaodong Cao, Shizhen Zhong, Yingjun Wang
Journal: ACS Applied Materials & Interfaces (2016): 19217–19227

Osteogenic and tenogenic induction of hBMSCs by integrated nanofibrous scaffold with chemical and structural mimic to bone-ligament connection
Authors: Zifeng Lin, Xiujuan Zhao, Si Chen, Chang Du
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2016)

The stimulation of the differentiation of pheochromocytoma (PC12-L) cells into neuron-like cells by electrically conductive nanofibre mesh
Authors: Huishang Yang, Guanglin Zhu, Yicheng Huang, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Applied Materials Today (2016): 215–222

Distinct mechanical behavior of HEK293 cells in adherent and suspended states
Authors: Seyed Mohammad Ali Haghparast, Takanori Kihara, Jun Miyake
Journal: PeerJ (2015): e1131

The preparation and characterization of polycaprolactone/graphene oxide biocomposite nanofiber scaffolds and their application for directing cell behaviors
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Journal: Journal of bioscience and bioengineering (2013): 380–385

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Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 红色荧光价格 2823
产品规格

500 Tests

产品货号

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 587 Em (nm) 603
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是一套荧光工具,用于标记亚细胞细胞器,如膜,溶酶体,线粒体和细胞核等。活细胞区的选择性标记提供了一种研究空间细胞事件的有效方法。

该特定试剂盒用于标记橙色荧光中固定细胞的F-肌动蛋白。该试剂盒使用橙色荧光鬼笔环肽缀合物,其选择性结合F-肌动蛋白。橙色荧光鬼笔环肽缀合物具有Ex / Em = 583 / 603nm。 缀合物对荧光成像也具有良好的光稳定性。 它是一种高亲和力探针,用于标记,鉴定和定量甲醛固定和透化组织切片,细胞培养或无细胞实验中的F-肌动蛋白。Cell Navigator F-肌动蛋白(F-Actin)标记试剂盒是美国AAT Bioquest 研发的产品。

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Texas Red 滤波片组
Em: Texas Red 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品分析 

概述

准备样品(微孔板孔)从板上取下液体

加入100μL/孔的iFluor 594-鬼笔环肽溶液

在室温下染色细胞15到60分钟洗涤细胞

在显微镜下观察样品(Ex / Em = 583/603 nm)

注意:打开前将所有组件加热至室温

 

操作步骤

1.准备1X iFluor 594-鬼笔环肽工作溶液:

将10μL的iFluor 594-鬼笔环肽(组分A)加入10mL标记缓冲液(组分B)中。

注意1:未使用的1X iFluor 594-鬼笔环肽原液应等分并保存在-20 ℃,避光。

注意2:不同的细胞类型可能染色不同。 应相应地制备iFluor 594-鬼笔环肽工作溶液的浓度。

 

2.染色细胞:

2.1执行甲醛固定。 在室温下用3.0-4.0%甲醛的PBS孵育细胞10-30分钟。

注意:避免使用任何含甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。 优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。

2.2用PBS冲洗固定的细胞2-3次。

2.3可选:在PBS中加入0.1%Triton X-100固定细胞(步骤2.2)3至5分钟,以增加渗透性。 用PBS冲洗细胞2-3次。

2.4将100μL/孔(96孔板)的iFluor 594-鬼笔环肽工作溶液(来自步骤1)加入固定的细胞(来自步骤2.2或2.3),并在室温下将细胞染色15至60分钟。

2.5用PBS轻轻冲洗细胞2至3次以去除多余的染料,然后进行板密封和成像。

 

试剂应用文献

Mussel-inspired conductive nanofibrous membranes repair myocardial infarction by enhancing cardiac function and revascularization

Authors: Yutong He, Genlan Ye, Chen Song, Chuangkun Li, Weirong Xiong, Lei Yu, Xiaozhong Qiu, Leyu Wang
Journal: Theranostics. 2018; 8(18): 5159–5177.

 

参考文献

Porous Li-containing biphasic calcium phosphate scaffolds fabricated by three-dimensional plotting for bone repair
Authors: Xiaoheng Guo, Huichang Gao, Xiao Liu, Jingjing Diao, Xuetao Shi, Naru Zhao, Yingjun Wang
Journal: RSC Advances (2017): 34508–34516

Preparation, characterization and in vitro cell performance of anti-washout calcium phosphate cement modified by sodium polyacrylate
Authors: Xingmei Li, Fupo He, Jiandong Ye
Journal: RSC Advances (2017): 32842–32849

miR-29b-Loaded Gold Nanoparticles Targeting to the Endoplasmic Reticulum for Synergistic Promotion of Osteogenic Differentiation
Authors: Ting Pan, Wenjing Song, Huichang Gao, Tianjie Li, Xiaodong Cao, Shizhen Zhong, Yingjun Wang
Journal: ACS Applied Materials & Interfaces (2016): 19217–19227

Osteogenic and tenogenic induction of hBMSCs by integrated nanofibrous scaffold with chemical and structural mimic to bone-ligament connection
Authors: Zifeng Lin, Xiujuan Zhao, Si Chen, Chang Du
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2016)

The stimulation of the differentiation of pheochromocytoma (PC12-L) cells into neuron-like cells by electrically conductive nanofibre mesh
Authors: Huishang Yang, Guanglin Zhu, Yicheng Huang, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Applied Materials Today (2016): 215–222

Distinct mechanical behavior of HEK293 cells in adherent and suspended states
Authors: Seyed Mohammad Ali Haghparast, Takanori Kihara, Jun Miyake
Journal: PeerJ (2015): e1131

The preparation and characterization of polycaprolactone/graphene oxide biocomposite nanofiber scaffolds and their application for directing cell behaviors
Authors: Juqing Song, Huichang Gao, Guanglin Zhu, Xiaodong Cao, Xuetao Shi, Yingjun Wang
Journal: Carbon (2015): 1039–1050

Actin-based biomechanical features of suspended normal and cancer cells
Authors: Seyed Mohammad Ali Haghparast, Takanori Kihara, Yuji Shimizu, Shunsuke Yuba, Jun Miyake
Journal: Journal of bioscience and bioengineering (2013): 380–385

 

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Navigator 线粒体标记试剂盒 蓝色荧光价格 2823
产品规格

500 Assays

产品货号

Cell Navigator 线粒体标记试剂盒 蓝色荧光

产品参数
Ex (nm) 344 Em (nm) 469
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Cell Navigator 线粒体标记试剂盒是一套荧光成像工具,用于标记细胞器细胞器,如膜,溶酶体,线粒体和细胞核等。活细胞线粒体的选择性标记为研究细胞事件提供了一种强有力的方法。这个特定的试剂盒旨在标记蓝色荧光的活细胞线粒体。该试剂盒使用专有染料,可根据线粒体膜电位梯度选择性累积在线粒体中。线粒体指示剂是一种疏水性化合物,可以很容易地渗透完整的活细胞,并在进入细胞后被困在线粒体中。该荧光线粒体指示剂长时间保留在线粒体中,因为该指示剂携带细胞保留组。这一关键特征显着提高了染色效率。它可以很容易地适用于各种荧光平台,如微孔板分析,免疫细胞化学和流式细胞术。它适用于多种研究,包括细胞粘附,趋化性,多药耐药性,细胞活力,细胞凋亡和细胞毒性。该试剂盒为所有重要组分提供了优化的细胞标记方案。它适用于增殖和非增殖细胞,可用于悬浮细胞和贴壁细胞。Cell Navigator 线粒体标记试剂盒是美国AAT Bioquest研发的产品。

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: DAPI 滤波片组
Em: DAPI 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品分析

1.准备线粒体染色溶液:

1.1将所有组件温度调至室温。

1.2通过将20μLMitolite Blue(组分A)稀释到10mL活细胞染色缓冲液(组分B)中制备染料工作溶液。

注1:对于一个96孔板,20μL的500X Mitolite Blue(组分A)就足够了。在≤-20ºC下等分并储存未使用的500X Mitolite Blue。避光,避免反复冻融循环。

注2:荧光线粒体指示剂的浓度根据具体应用而变化。可以根据特定细胞类型和细胞或组织对探针的渗透性来修改染色条件。

2.准备和染色细胞:

2.1对于粘附细胞:在96孔黑色墙壁/透明底板上或在装有适当培养基的培养皿内的盖玻片上培养细胞。当细胞达到所需的汇合时,加入等体积(例如对于96孔板为100μL,对于384孔板为25μL)的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37ºC,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。用Hanks和20mM Hepes缓冲液(HH缓冲液)或您选择的缓冲液(例如浓度为1:1的生长培养基缓冲液)替换染料上样溶液。使用配有DAPI过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注意:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或孵育时间以使染料积累。

2.2对于悬浮细胞:以1000rpm离心细胞5分钟以获得细胞沉淀并吸出上清液。在预热(37℃)生长培养基中轻轻重悬细胞沉淀,并加入等体积的染料加工溶液(来自步骤1.2)。将细胞在37ºC,5%CO2培养箱中孵育30分钟至2小时。用Hanks和20mM Hepes缓冲液(HH缓冲液)或您选择的缓冲液(例如浓度为1:1的生长培养基缓冲液)替换染料上样溶液。使用配有DAPI过滤器组的荧光显微镜观察细胞。

注1:如果细胞看起来没有充分染色,建议增加标记浓度或培养时间以使染料积累。

注2:悬浮细胞可以附着在用BD Cell-Tak®(BD Biosciences)处理过的盖玻片上,并作为粘附细胞染色(见步骤2.1)。

 Cell Navigator 线粒体标记试剂盒 蓝色荧光

图1.用Cell Navigator TM线粒体染色试剂盒染色的HeLa细胞图像* 96孔透明底板中的蓝色荧光*

 

参考文献

Co-delivery of VP-16 and Bcl-2-targeted antisense on PEG-grafted oMWCNTs for synergistic in vitro anti-cancer effects in non-small and small cell lung cancer
Authors: Zbynek Heger, Hana Polanska, Sona Krizkova, Jan Balvan, Martina Raudenska, Simona Dostalova, Amitava Moulick, Michal Masarik, Vojtech Adam
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2017): 131–140

Inhibition of heme oxygenase-1 enhances the chemosensitivity of laryngeal squamous cell cancer Hep-2 cells to cisplatin
Authors: Xin Lv, Dong-mei Song, Ying-hao Niu, Bao-shan Wang
Journal: Apoptosis (2016): 489–501

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Authors: Qianli Zou, Hongyou Zhao, Yuxia Zhao, Yanyan Fang, Defu Chen, Jie Ren, Xiaopu Wang, Ying Wang, Ying Gu, Feipeng Wu
Journal: Journal of medicinal chemistry (2015): 7949–7958

Melatonin promotes adipogenesis and mitochondrial biogenesis in 3T3-L1 preadipocytes
Authors: Hisashi Kato, Goki Tanaka, Shinya Masuda, Junetsu Ogasawara, Takuya Sakurai, Takako Kizaki, Hideki Ohno, Tetsuya Izawa
Journal: Journal of Pineal Research (2015): 267–275