Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒 NIR荧光是美国AAT Bioquest生产的染色细胞的试剂盒，我们的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒是一套用于标记细胞的工具，用于细胞功能的荧光显微镜研究。细胞的有效标记为在空间和时间背景下研究细胞事件提供了有利的方法。这个特殊的试剂盒设计用红外荧光均匀标记固定的哺乳动物细胞，用于红色激光激发的流式细胞仪应用。 该试剂盒使用专有的红色荧光染料，在与细胞成分结合后更加荧光。 试剂盒中使用的荧光染料被激发，其中红色（635nm）在775nm处具有荧光（APC / CY7通道）。 该试剂盒提供所有必需组件和优化的细胞标记协议。 它是保存特定细胞荧光图像的工具，也可用于荧光流式细胞仪应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒。 

染色样品示例

概述

1.用HHBS制备样品（0.5 mL /分析）
2.替换为HHBS
3.将Stain It™NIR荧光添加到细胞悬浮液中
4.在室温或37°C下染色细胞20-60分钟
5.洗净细胞
6.固定细胞（可选）
7.使用适当的激发/发射滤光片，用流式细胞仪和/或荧光显微镜检查样品

注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有组分

操作步骤

表1.用于流式细胞术分析的荧光光谱特性和激发光

1.使用1X Hanks和20 mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的无叠氮化钠和无血清/蛋白质的缓冲液制备细胞。

2.用HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液洗涤细胞一次。

3.以5-10×10⁶ / mL的浓度在HHBS或您选择的无叠氮化物和无血清/蛋白质的缓冲液中重悬细胞。

4.将1 µL 500X Stain It NIR荧光储备液添加到0.5 mL细胞/测定中，并充分混合。

5.在室温或37°C，5％CO₂的培养箱中避光保存20-60分钟。 注意：应根据不同细胞系实验确定的染色浓度和孵育时间。

6.洗涤细胞两次，然后用HHBS或您选择的缓冲液重悬细胞。

7.根据需要固定细胞（可选）。

8.使用适当的激发/发射滤光片，使用流式细胞仪和/或荧光显微镜分析细胞（参见表1）。

数据分析

图1.通过Live或Dead 可固定死细胞染色试剂盒检测Jurkat细胞活力（Cat＃22605）。处理Jurkat细胞并用Stain It NIR染色，然后在3.7％甲醛中固定并通过流式细胞术分析。 用APC-Cy7通道区分活（红色），热处理（绿色）和未染色（蓝色）细胞。

参考文献

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