Cyber​​ Orange 是一种出色的核酸凝胶染料，与核酸结合后显示出较大的荧光增强。它具有与SYBR®Gold相同的光谱特性，因此可以很好地替代SYBR®Gold（SYBR®Gold是Invitrogen的商标）。它是可用于检测琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA的最敏感的染色剂之一。Cyber​​ Orange对DNA的敏感性高于对RNA的敏感性，非常适合与SYBR Gold仪器设置相同的激光扫描仪一起使用。Cyber​​琼脂糖对琼脂糖凝胶中的DNA比溴化乙锭敏感得多，并且在凝胶上可检测到低至皮克dsDNA。

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样品实验方案

溶液配制

工作溶液

Cyber​​ Orange 工作溶液（1X）：
通过将10,000X储备试剂稀释到pH 7.5-8缓冲液（例如TAE，TBE或TE，最好是pH 8.0）中来制成1X Cyber​​ Orange 工作溶液。 注意：  在水中配制的染色溶液比在缓冲液中配制的溶液不稳定，必须在24小时内使用以确保最大的染色敏感性。 注意：  此外，在pH低于7.5或高于8.0的缓冲液中制备的染色溶液稳定性较差，并且染色效果降低。

操作步骤

1.染色后方案

1.1根据您的标准方案运行凝胶。

1.2将凝胶放在合适的聚丙烯容器中。轻轻加入足量的1X Cyber​​ Orange 工作溶液以浸没凝胶。 注意：  请勿使用玻璃容器，因为它会吸收染色溶液中的许多染料。

1.3避开光线，在室温下轻轻搅拌凝胶约30分钟。 注意：  染色溶液可以在黑暗中（最好冷藏）保存一周，并可以重复使用2-3次。

1.4使用长路径绿色滤光片（例如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片），使用254 nm透照器或基于激光的凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

2.预染方案

2.1使用标准方案准备琼脂糖凝胶溶液。

2.2在凝胶中添加1X Cyber​​ Orange™工作溶液并充分混合。

2.3根据您的标准方案运行凝胶。

2.4使用长路径绿色滤光片（例如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片），使用254 nm透照器或基于激光的凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

3.电泳前的DNA染色

3.1电泳前，将DNA与染料的1：1000至1：3000稀释液（在TE，TBE或TAE中）孵育至少15分钟。

3.2根据您的标准方案运行凝胶。

3.3使用254 nm透照器或使用长距离绿色滤光片（例如SYBR®滤光片或GelStar®滤光片）的基于激光的凝胶扫描仪对染色的凝胶成像。

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