732-6880 732-6890-美国伯乐Bio-Rad PureZOL RNA 分离试剂

【简单介绍】

美国伯乐Bio-Rad PureZOL RNA 分离试剂732-6880 732-6890,多种产品用于分离总 RNA,分离的产物纯度高,完整并适合任何下游应用,包括定量实时PCR、Northern 杂交和芯片分析

【详细说明】

美国伯乐Bio-Rad PureZOL RNA 分离试剂732-6880  732-6890
多种产品用于分离总 RNA,分离的产物纯度高,完整并适合任何下游应用,包括定量实时PCR、Northern 杂交和芯片分析

PureZOL  RNA 分离试剂 是 一种苯酚和异硫氰酸胍的液相溶液,是改良的 Chomczynski 和 Sacchi ( 987 ) 的一步法分离总 RNA 技术。

PureZOL RNA 分离试剂操作是在 Chomczynski 和 Sacchi ( 987 ) 的快速、广泛使用的有效 RNA 分离方法基础上改进而得。PureZOL RNA 分离试剂是一种苯酚和促溶剂异硫氰酸胍的液相化合物,简单的一步就可以高效地完成细胞和组织溶解、去除RNA 蛋白和灭活内源 DNA 酶。DNA 和蛋白通过液相分层,有效地与 RNA 分离开。

        预制的 PureZOL RNA 分离试剂是通用和高效的 RNA 分离手段,可以从来源广泛的材料,包括培养细胞、动物和植物组织、酵母、病毒及细菌样品中分离出高产量RNA。这个解决方案允许使用少量的组织或细胞,这点非常适用于基因表达研究或其他的珍贵稀有样品。

       用 PureZOL 分离的总 RNA, 无 DNA 和蛋白污染,可用于 Northern 杂交分析、体外翻译、poly(A)+ 选择、RNA 酶保护试验、RT-PCR 和分子克隆。由于无需离心柱,程序可升级适用于大范围的分子量样品
处理。

美国伯乐Bio-Rad PureZOL RNA 分离试剂732-6880  732-6890订货信息

732-6880     PureZOL RNA Isolation Reagent,   50 ml
732-6890     PureZOL RNA Isolation Reagent,   100 ml

norgenbiotek唾液RNA收集和保存装置怎么样

norgenbiotek唾液RNA收集和保存装置怎么样

Norgen的唾液RNA收集和保存设备旨在1)简单和非侵入性的唾液收集和2)在环境温度下保存唾液样本中的RNA。唾液样本通过在收集漏斗内吐痰来收集,该收集漏斗已与收集管组装在一起。在收集到所需体积的唾液后,取下收集漏斗,然后加入防腐剂安瓿的内容物并与收集的唾液混合。唾液收集管随后被送到实验室进行RNA分离和分析。保存样品中的唾液RNA在室温下可稳定长达2个月。该试剂盒是收集和保存RNA样本进行流行病学和人群研究的理想选择。

特点和优势

保存的RNA在室温下可稳定长达2个月 

样品收集和保存在一个方便的套件中 样本没有传染性,

可以在环境温度下安全处理和运输 

非侵入性、用户友好的收集,

适合自我收集 

省事且经济高效-无需冷藏运输/储存 

与RNA分离方法兼容 

保存与任何下游应用兼容的高质量RNA 

提供CE-IVD标记版本

使用 LumiZol 试剂快速分离 RNA、DNA 和蛋白质

使用 LumiZol 试剂快速分离 RNA、DNA 和蛋白质

LumiZol Reagent 设计用于从各种来源(植物、动物、细菌和酵母)的细胞和组织样品中快速分离 RNA、DNA 和蛋白质。 LumiZol Reagent 是一种含有苯酚、异硫氰酸胍以及分离高质量核酸和蛋白质所需的其他成分的溶液。苯酚和异硫氰酸胍可裂解细胞并有效抑制核糖核酸酶,从而保持 RNA 完整。均质化并添加氯仿后,样品分离成上层水相、中间相和下层有机相。 RNA 可以用异丙醇从上相沉淀,而 DNA 和蛋白质可以分别用乙醇和异丙醇从中间相和下层有机相沉淀。

用于 RNA、DNA 和蛋白质分离的样品:

  • 植物和动物组织——30-100毫克;

  • 贴壁真核细胞 — 1×10 5至 1×10<sup7< sup=”” style=”box-sizing: border-box;”>;

  • 悬浮真核细胞、酵母 — 5×10 6至 10×10 6

  • 细菌细胞 — 1×10 7

RNA分离

使用新鲜或液氮速冻样品以获得最佳 RNA 分离效果。在 LumiZol 试剂中均质化之前,请勿解冻样品。

  1. 根据您的起始材料在 LumiZol 试剂中裂解样品:

    • 组织:在 1 mL LumiZol 试剂中匀浆组织样本,并将匀浆转移至新的 1.5 mL 管中。

    • 细胞:弃去培养基,用 0.5–1 mL LumiZol 试剂重悬细胞沉淀或单层细胞,然后将裂解物转移至新的 1.5 mL 试管中。

  2. (可选)如果样品脂肪含量高,则将裂解液在 4 °C 下以 12,000 × g 离心 5 分钟,然后将上清液转移至新的 1.5 mL 管中。

  3. 将管在室温下孵育 5 分钟。

  4. 向裂解液中添加 0.2 mL 氯仿(每 1 mL 用于裂解的 LumiZol 试剂),通过翻转管充分混合,并在室温下孵育 2 分钟。

  5. 将管在 4°C 下以 12,000 × g 离心 15 分钟。离心后,混合物分成两相:无色水相和黄色有机相,其间有中间相。

  6. 将上层水相转移至新的 1.5 mL 管中,不要接触间相。如果样品中RNA的量非常少,则在水相中添加共沉淀剂。保留有机相和界面用于 DNA 和蛋白质提取。

  7. 向水相中加入0.8体积的异丙醇,充分混合,并在室温下孵育10分钟。

  8. 将管在 4°C 下以 12,000 × g 离心 10 分钟。

  9. 弃去上清液,向 RNA 沉淀中加入 1 mL 70% 乙醇,充分混匀,并在 4 °C 下以 7,500 × g离心管 5 分钟。

  10. 弃去上清液,将 RNA 沉淀风干 5-10 分钟。

  11. 将 RNA 沉淀溶解在 50–100 μL 无 RNase 水中。

DNA分离

  1. 除去“RNA 分离”部分步骤 5 中获得的界面上的任何剩余水相。

  2. 向界面相和有机相中添加 0.3 mL 100% 乙醇(每 1 mL 《RNA 分离》步骤 1 中使用的 LumiZol 试剂),通过翻转管混合,并在室温下孵育 2-3 分钟。

  3. 将管在 4 °C 下以 2,000 × g 离心 5 分钟。将上清液转移至新的 1.5 mL 管中。上清液可用于后续的蛋白质提取。

  4. 将 DNA 沉淀重悬于 1 mL 柠檬酸钠/乙醇溶液(10% 乙醇中的 0.1 M 柠檬酸钠,pH 8.5)中。

  5. 孵育 30 分钟,偶尔混合。

  6. 将管在 4 °C 下以 2,000 × g 离心 5 分钟。丢弃上清液。

  7. 再重复一次步骤 4-6。

  8. 将 1 mL 70% 乙醇添加到 DNA 沉淀中,充分混匀,然后在 4 °C 下以 2,000 × g离心管 5 分钟。

  9. 弃去上清液,将 DNA 沉淀风干 5-10 分钟。

  10. 将 DNA 沉淀重悬于 0.3–0.6 mL 的 8 mM 氢氧化钠中。

  11. 将管在 4 °C 下以 12,000 × g 离心 10 分钟,将上清液转移至新的 1.5 mL 管中,并用 Tris-HCl 缓冲液将 pH 调节至 7–8 [添加 5 μL 1 M Tris-HCl 缓冲液(pH 4.5)至300μL DNA溶液]。

蛋白质分离

  1. 向《DNA 分离》部分第 3 步获得的上清液中添加 1.5 mL 异丙醇(每 1 mL 《RNA 分离》步骤 1 中使用的 LumiZol 试剂),通过翻转管充分混合,并孵育 10分钟在室温下。

  2. 将管在 4°C 下以 12,000 × g 离心 10 分钟。丢弃上清液。

  3. 将蛋白质沉淀重新悬浮在 2 mL 盐酸胍/乙醇溶液(0.3 M 盐酸胍于 95% 乙醇中)中。

  4. 将管在室温下孵育 20 分钟。

  5. 将管在 4 °C 下以 7,500 × g 离心 5 分钟。丢弃上清液。

  6. 再重复步骤 3-5 两次。

  7. 向蛋白沉淀中加入 2 mL 100% 乙醇,充分混匀,室温孵育 20 分钟。

  8. 将管在 4 °C 下以 7,500 × g 离心 5 分钟。丢弃上清液。

  9. 将蛋白质沉淀风干 5-10 分钟。

  10. 将蛋白质沉淀溶解在含有 SDS 的缓冲液中(例如,用于将蛋白质样品加载到聚丙烯酰胺凝胶上的样品缓冲液)。

羟芪巴脒*DNA和RNA染料* CAS 223769-64-0-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
羟芪巴脒*DNA和RNA染料* CAS 223769-64-0价格 1386
产品规格

10 mg

产品货号

羟芪巴脒*DNA和RNA染料* CAS 223769-64-0

产品参数
Ex (nm) 358 Em (nm) 433
分子量 472.54 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:羟芪巴脒*DNA和RNA染料*

CAS:223769-64-0

储存条件:保存在冰箱-15℃干燥

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:472.54

外观:黄色粉末

溶剂:水或0.9%PBS

Ex(nm):360

Em(nm):625

 

产品介绍

羟芪巴脒(也称为Fluoro Gold)用于染色DNA和RNA。与RNA相比,当与DNA结合时,它表现出明显不同的荧光发射谱。该阳离子染料也经常用作逆行神经元示踪剂。

点击查看光谱

实验方案

染色细胞示例

 

羟芪巴脒的使用与其他荧光示踪剂基本相同。主要区别在于Fluoro-Gold在注射后存活时间,浓度范围,组织和与其他组织化学技术的兼容性方面更灵活。 它比大多数其他荧光示踪剂更耐褪色,更亮和荧光时间更长。

1.染料浓度:建议使用1至10%羟基芪脒。初,建议浓度为4%。如果在注射部位发生坏死,或标记太强,则将浓度降低至2%溶液。

2.染料管理:

2.1压力注入 – 注射的体积范围为0.05-1μl,通常为0.1-0.2μl。

2.2结晶 -可以从微量移液管的施用示踪剂的晶体。

3.固定剂:可以使用任何固定剂或不使用固定剂,但常使用含有4%甲醛的PBS。含有高浓度重金属(如锇,汞)的固定剂会淬灭荧光,而高浓度(超过1%)的戊二醛可能会增加背景荧光。

4.组织化学处理:含有羟基芪脒的组织可以根据几乎任何常见的组织学技术进行处理。常使用固定组织的冷冻切片。

5.适用实验:可以进一步处理切片用于第二标记,例如放射自显影,HRP组织化学,免疫细胞化学,第二荧光示踪剂,荧光复染剂等。

6.固定、覆盖:通常将切片安装在涂有明胶的载玻片上,风干,浸入二甲苯中,并用非荧光DPX塑料封固剂盖上盖玻片。切片可以用分级醇脱水,除非这与第二示踪剂不相容。如果将羟基噻嗪与荧光免疫细胞化学组合,则将切片风干并直接用DPX盖上盖玻片。

7.照相:使用宽带紫外激发滤光片(激发 –  323nm,发射 – 中性pH为620nm),用荧光显微镜观察羟基芪脒。当用中性pH缓冲液处理组织时发出金色,而当用酸性(例如PH3.3)pH缓冲液处理组织时发出蓝色。它可以用数码或胶片拍摄(使用Ektachrome 200-400 ASA胶片进行彩色打印,使用可比较的速度胶片进行黑白打印)。大多数曝光时间范围为10-60秒曝光,具体取决于物镜放大倍数和标记强度。三十(30)秒的暴露是平均的。可以利用多次暴露来同时显现羟基噻嗪和另一种示踪剂。因此,UV将与明场照明相结合,以在放射自显影中同时定位具有HRP或银颗粒的Fluoro-Gold。类似地,蓝光激发可以组合以也可视化FITC的绿色发射颜色,而绿色激发光可以用于同时观察碘化丙啶或溴化乙锭(荧光复染剂)的红色发射颜色。

 

参考文献

Inoculation of α-synuclein preformed fibrils into the mouse gastrointestinal tract induces Lewy body-like aggregates in the brainstem via the vagus nerve
Authors: Norihito Uemura, Hisashi Yagi, Maiko T Uemura, Yusuke Hatanaka, Hodaka Yamakado, Ryosuke Takahashi
Journal: Molecular Neurodegeneration (2018): 21

StrandBrite 绿色RNA定量试剂*200X DMSO溶解-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
StrandBrite 绿色RNA定量试剂*200X DMSO溶解 价格 4245
产品规格

1 ml

产品货号

StrandBrite 绿色RNA定量试剂*200X DMSO溶解

产品参数
Ex (nm) 509 Em (nm) 527
分子量 N/A 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

StrandBrite 绿色RNA定量试剂是美国AAT Bioquest生产的用于定量RNA的试剂,检测和定量少量RNA对于多种分子生物学程序极为重要,例如在进行Northern blot分析,S1核酸酶测定,RNase保护测定,cDNA文库制备,反向操作之前,测量体外转录RNA的产量和测量RNA浓度。转录PCR和差异展示PCR。测量核酸浓度常用的技术是测定260 nm的吸光度。基于吸收率的方法的主要缺点是蛋白质,游离核苷酸和其他紫外线吸收化合物引起的干扰。使用敏感的荧光核酸染色剂可缓解此干扰问题。StrandBrite RNA定量试剂是一种超灵敏的荧光核酸染料,用于定量溶液中的RNA。StrandBrite RNA定量试剂可通过荧光酶标仪或荧光计检测低至5 ng / mL的RNA。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的StrandBrite 绿色RNA定量试剂。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 490 nm
Em: 525 nm
Cutoff: 515 nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
   
实验方案

样品实验方案

溶液配制

工作溶液配制

1.准备StrandBrite 工作溶液:

1.1  准备的水溶液工作溶液StrandBrite 绿色通过在TE浓缩DMSO溶液的200倍稀释液(在DEPC的10mM的Tris-HCl,1mM的EDTA,pH 7.5中经处理的水)。例如,添加50μL StrandBrite 绿色 至10mL TE缓冲液,以制备足够的工作溶液在200至100个测定样品 μ L终体积。通过用箔纸覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。

注意1:我们建议在塑料容器中而不是玻璃中制备此溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。

注意2:为获得佳结果,应在准备后的几个小时内使用此溶液。

 

标准液配制:

1.准备RNA标准液的系列稀释液(0到1µg / mL ):

1.1准备一个100 μ 克/ mL储备在RNA的溶液DEPC处理过的水。

1.2添加10μL 100 μ 克/毫升RNA储备溶液(来自步骤2.1) ,以490 μ 大号测定缓冲液(成分B)为具有2 微克/ mL的RNA溶液,然后执行1:2系列稀释来获得1000, 500、250、125、62.5、31.3、15.6和0 ng / mL。

1.3如表1和表2所述,将RNA标准品和含RNA 的测试样品添加到96孔黑色固体微孔板中。

 

表1黑色固体96孔微孔板中RNA标准品和测试样品的布局

BL BL TS TS
RS1 RS1
RS2 RS2
RS3 RS3    
RS4 RS4    
RS5 RS5    
RS6 RS6    
RS7 RS7    

注:RS = RNA 标准;BL =空白控制;TS =测试样品

表2每个孔的试剂组成

RNA标准 空白对照 测试样品
连续稀释(100ul) TL:100ul 100ul

注:将从15.6到1000 ng / mL的RNA标准品的系列稀释液一式两份地添加到DS1到DS7的孔中。

 

运行RNA assay分析:

1.将100μLStrandBrite Green工作溶液(来自步骤2)添加到RNA标准品,空白对照和测试样品(参见步骤3)的每个孔中,以使总RNA测定体积为200μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔添加25μL样品和25μLStrandBrite Green工作溶液。

2.在避光的条件下,将反应在室温下孵育5至10分钟。

3.用分光荧光计在Ex / Em = 490/525 nm (在515 nm 处截止)监测荧光的增加。

注意:为使光漂白效应小化,请对所有样品保持恒定的荧光测量时间。

4.用空白孔(仅含测定缓冲液)中的荧光作为对照,并从具有RNA标准液或测试样品的比色皿中减去。RNA样品的浓度根据RNA标准曲线测定。

 

参考文献

Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247

Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444

Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010

Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933

Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95

Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen dye
Authors: Moreno LA, Cox KL.
Journal: J Vis Exp. (2010)

Development and characterization of a novel host cell DNA assay using ultra-sensitive fluorescent nucleic acid stain “PicoGreen”
Authors: Ikeda Y, Iwakiri S, Yoshimori T.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2009): 997

Enhanced DNA dynamics due to cationic reagents, topological states of dsDNA and high mobility group box 1 as probed by PicoGreen
Authors: Noothi SK, Kombrabail M, Kundu TK, Krishnamoorthy G, Rao BJ.
Journal: FEBS J (2009): 541

Factors affecting quantification of total DNA by UV spectroscopy and PicoGreen fluorescence
Authors: Holden MJ, Haynes RJ, Rabb SA, Satija N, Yang K, Blasic JR, Jr.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 7221

Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
Authors: Ren X, Xu QH.
Journal: Langmuir (2009): 43

StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 适合于酶标仪-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 适合于酶标仪 价格 4245
产品规格

1000 Tests

产品货号

StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 适合于酶标仪

产品参数
Ex (nm) 509 Em (nm) 527
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的RNA检测试剂盒,检测和定量少量RNA对于各种分子生物学程序非常重要,例如测量体外转录RNA的产量和测量RNA浓度,然后进行Northern印迹分析,S1核酸酶测定,RNase保护测定,cDNA文库制备,反向转录PCR和差异显示PCR。常用的测量核酸浓度的技术是测定260nm处的吸光度。基于吸光度的方法的主要缺点是由蛋白质,游离核苷酸和其他UV吸收化合物引起的干扰。使用敏感的荧光核酸染色可以缓解这种干扰问题。 StrandBrite RNA定量试剂是一种超灵敏荧光核酸染色剂,用于定量溶液中的RNA。 StrandBrite RNA定量试剂可使用荧光酶标仪或荧光分光光度计检测低至5 ng / mL的RNA。我们的StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒包括我们的StrandBrite 绿色核酸染色,具有优化且稳健的方案。它提供了一种方便的方法来量化溶液中的RNA。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 490 nm
Em: 545 nm
Cutoff: 515 nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
   
实验方案

96孔板检测示例

操作步骤

以下方案是使用StrandBrite Green定量RNA的示例。 打开前让所有组件升温至室温。处理所有材料时,务必使用干净的一次性手套 使用无核酸酶水和无菌一次性聚丙烯塑料制品进行试剂制备。

注意:没有数据可用于解决StrandBrite Green RNA染色的致突变性或毒性。 因为这种试剂与核酸结合,所以应将其作为潜在的诱变剂进行处理,并进行适当的处理。 应谨慎处理DMSO储备溶液,因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。

 

1.准备1X测定缓冲液

通过用无菌,蒸馏,无核酸酶的水稀释浓缩的缓冲液20X(组分B)来制备1X测定缓冲液。

 

2.准备StrandBrite 绿色工作溶液

通过在1X测定缓冲液中将浓缩的DMSO溶液稀释200倍来制备StrandBrite Green工作溶液。例如,将50μLStrandBrite Green(组分A)加入10 mL 1X测定缓冲液中(来自步骤1)。通过用铝箔覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。

注1:我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备,因为染料可能会吸附到玻璃表面。

注2:为获得佳结果,该溶液应在制备后几小时内使用。

 

3.准备RNA标准品的连续稀释液(0至1μg/ mL):

3.1将10μL100μg/ mL RNA原液(组分C)加入990μL分析缓冲液(组分B)中,得到1μg/ mL RNA溶液,然后进行1:3连续稀释,得到约1000,300, 100,30,10,3,1和0 ng / mL。

注意:未使用的核糖体RNA标准品(组分C)应在无核酸酶的塑料瓶中分成单次使用的等分试样,并储存在-20℃。

3.2如说明书中表1和2中所述,将RNA标准品和含有测试样品的RNA添加到96孔固体黑色微孔板中。

 

4.运行RNA测定:

4.1将100μLStrandBrite 绿色工作溶液(来自步骤2)添加到RNA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤3)中,使总RNA测定体积为200μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLStrandBrite 绿色工作溶液。

4.2在室温下孵育反应2至5分钟,避光。

4.3使用荧光分光光度计在Ex / Em = 490 / 545nm(515nm处的截止值)下观察荧光增加。

注意:为尽量减少光漂白,请保持所有样品的荧光测量时间不变。

4.4空白孔中的荧光(仅含测定缓冲液)用作对照,并从具有RNA标准品或测试样品的那些比色皿的值中减去。根据RNA标准曲线确定样品的RNA浓度。

 

参考文献

Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247

Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444

Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010

Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933

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Journal: J Pharm Biomed Anal (2009): 997

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Authors: Holden MJ, Haynes RJ, Rabb SA, Satija N, Yang K, Blasic JR, Jr.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 7221

Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
Authors: Ren X, Xu QH.
Journal: Langmuir (2009): 43

 

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产品规格

100 Tests

产品货号

StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒

产品参数
Ex (nm) 509 Em (nm) 527
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的RNA检测试剂盒,检测和定量少量RNA对于各种分子生物学程序非常重要,例如测量体外转录RNA的产量和测量RNA浓度,然后进行Northern印迹分析,S1核酸酶测定,RNase保护测定,cDNA文库制备,反向转录PCR和差异显示PCR。常用的测量核酸浓度的技术是测定260nm处的吸光度。基于吸光度的方法的主要缺点是由蛋白质,游离核苷酸和其他UV吸收化合物引起的干扰。使用敏感的荧光核酸染色可以缓解这种干扰问题。 StrandBrite RNA定量试剂是一种超灵敏荧光核酸染色剂,用于定量溶液中的RNA。 StrandBrite RNA定量试剂可使用荧光酶标仪或荧光分光光度计检测低至5 ng / mL的RNA。我们的StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒包括我们的StrandBrite 绿色核酸染色,具有优化且稳定的方案。它提供了一种方便的方法来量化溶液中的RNA。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 。 

 

适用仪器


分光光度计  
Ex: 490 nm
Em: 545 nm
Cutoff: 515 nm
实验方案

96孔板检测示例

操作步骤

以下方案是使用StrandBrite Green定量RNA的示例。 打开前让所有组件升温至室温。处理所有材料时,务必使用干净的一次性手套 使用无核酸酶水和无菌一次性聚丙烯塑料制品进行试剂制备。

注意:没有数据可用于解决StrandBrite Green RNA染色的致突变性或毒性。 因为这种试剂与核酸结合,所以应将其作为潜在的诱变剂进行处理,并进行适当的处理。 应谨慎处理DMSO储备溶液,因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。

 

1.准备1X测定缓冲液

通过用无菌,蒸馏,无核酸酶的水稀释浓缩的缓冲液20X(组分B)来制备1X测定缓冲液。

 

2.准备StrandBrite 绿色工作溶液

通过在1X测定缓冲液中将浓缩的DMSO溶液稀释200倍来制备StrandBrite Green工作溶液。例如,将50μLStrandBrite Green(组分A)加入10 mL 1X测定缓冲液中(来自步骤1)。通过用铝箔覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。

注1:我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备,因为染料可能会吸附到玻璃表面。

注2:为获得佳结果,该溶液应在制备后几小时内使用。

 

3.准备RNA标准品的连续稀释液(0至1μg/ mL):

3.1将10μL100μg/ mL RNA原液(组分C)加入990μL分析缓冲液(组分B)中,得到1μg/ mL RNA溶液,然后进行1:3连续稀释,得到约1000,300, 100,30,10,3,1和0 ng / mL。

注意:未使用的核糖体RNA标准品(组分C)应在无核酸酶的塑料瓶中分成单次使用的等分试样,并储存在-20℃。

3.2如说明书中表1和2中所述,将RNA标准品和含有测试样品的RNA添加到96孔固体黑色微孔板中。

 

4.运行RNA测定:

4.1将100μLStrandBrite 绿色工作溶液(来自步骤2)添加到RNA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤3)中,使总RNA测定体积为200μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLStrandBrite 绿色工作溶液。

4.2在室温下孵育反应2至5分钟,避光。

4.3使用荧光分光光度计在Ex / Em = 490 / 545nm(515nm处的截止值)下观察荧光增加。

注意:为尽量减少光漂白,请保持所有样品的荧光测量时间不变。

4.4空白孔中的荧光(仅含测定缓冲液)用作对照,并从具有RNA标准品或测试样品的那些比色皿的值中减去。根据RNA标准曲线确定样品的RNA浓度。

 

参考文献

Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247

Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444

Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010

Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933

Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95

Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen dye
Authors: Moreno LA, Cox KL.
Journal: J Vis Exp. (2010)

Development and characterization of a novel host cell DNA assay using ultra-sensitive fluorescent nucleic acid stain “PicoGreen”
Authors: Ikeda Y, Iwakiri S, Yoshimori T.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2009): 997

Enhanced DNA dynamics due to cationic reagents, topological states of dsDNA and high mobility group box 1 as probed by PicoGreen
Authors: Noothi SK, Kombrabail M, Kundu TK, Krishnamoorthy G, Rao BJ.
Journal: FEBS J (2009): 541

Factors affecting quantification of total DNA by UV spectroscopy and PicoGreen fluorescence
Authors: Holden MJ, Haynes RJ, Rabb SA, Satija N, Yang K, Blasic JR, Jr.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 7221

Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
Authors: Ren X, Xu QH.
Journal: Langmuir (2009): 43

 

相关产品

产品名称 货号
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 高选择性 Cat#17657
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 Cat#17656

StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 高选择性-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 高选择性价格 4957
产品规格

100 Tests

产品货号

StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 高选择性

产品参数
Ex (nm) 509 Em (nm) 527
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的RNA检测试剂盒,分析活细胞中 RNA 的主要挑战是 DNA 引起的干扰。为了解决这些困难,AAT Bioquest 开发了 StrandBrite™ RNA Green,这是一种出色的 RNA 选择性探针,在与 RNA 结合后可产生显着增强的绿色荧光。它已成功用于活细胞的流式细胞分析。 StrandBrite™ RNA Green 很容易进入活细胞。它的激发/发射波长为490/540 nm。在DNase消化测试中,用StrandBrite RNA Green染色的固定细胞中没有观察到荧光强度的显着变化。相反,RNase 消化后,初始荧光信号立即减弱。这些结果表明,初始荧光信号是由 StrandBrite RNA Green 与细胞中 RNA 的特异性相互作用产生的。活细胞短暂暴露于抗霉素 D 确实会在药物去除后 6 小时内以剂量依赖性方式抑制 RNA 合成。这些数据表明 StrandBrite RNA Green 是一种灵敏的 RNA 选择性染料,用于对活细胞和固定细胞中的核仁 RNA 进行染色。 StrandBrite RNA Green 比常用的 SYTO® RNASelect™ 染料具有更少的 DNA 干扰。 StrandBrite™ RNA Green 是一种高度 RNA 选择性荧光探针。由于其优异的细胞通透性和光谱特性,已成功用于活细胞中的流式细胞术RNA分析和荧光显微镜。它可以用 488 nm 蓝色激光很好地激发并在 FITC 通道中进行监测。 StrandBrite™ RNA Green 提供了一种通过单个孵育步骤识别和标记细胞的有价值的方法,并且可以比常用的 SYTO® RNASelect™ 具有更好的选择性区分 RNA 和 DNA。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 490 nm
Em: 540 nm
Cutoff: 515 nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
   
实验方案

96孔板检测示例

操作步骤

以下方案是使用StrandBrite Green定量RNA的示例。 打开前让所有组件升温至室温。处理所有材料时,务必使用干净的一次性手套 使用无核酸酶水和无菌一次性聚丙烯塑料制品进行试剂制备。

注意:没有数据可用于解决StrandBrite Green RNA染色的致突变性或毒性。 因为这种试剂与核酸结合,所以应将其作为潜在的诱变剂进行处理,并进行适当的处理。 应谨慎处理DMSO储备溶液,因为已知DMSO有助于有机分子进入组织。

 

1.准备1X测定缓冲液

通过用无菌,蒸馏,无核酸酶的水稀释浓缩的缓冲液20X(组分B)来制备1X测定缓冲液。

 

2.准备StrandBrite 绿色工作溶液

通过在1X测定缓冲液中将浓缩的DMSO溶液稀释200倍来制备StrandBrite Green工作溶液。例如,将50μLStrandBrite Green(组分A)加入10 mL 1X测定缓冲液中(来自步骤1)。通过用铝箔覆盖或将其置于黑暗中来保护工作溶液免受光照。

注1:我们建议将此溶液用塑料容器而不是玻璃制备,因为染料可能会吸附到玻璃表面。

注2:为获得佳结果,该溶液应在制备后几小时内使用。

 

3.准备RNA标准品的连续稀释液(0至1μg/ mL):

3.1将10μL100μg/ mL RNA原液(组分C)加入990μL分析缓冲液(组分B)中,得到1μg/ mL RNA溶液,然后进行1:3连续稀释,得到约1000,300, 100,30,10,3,1和0 ng / mL。

注意:未使用的核糖体RNA标准品(组分C)应在无核酸酶的塑料瓶中分成单次使用的等分试样,并储存在-20℃。

3.2如说明书中表1和2中所述,将RNA标准品和含有测试样品的RNA添加到96孔固体黑色微孔板中。

 

4.运行RNA测定:

4.1将100μLStrandBrite 绿色工作溶液(来自步骤2)添加到RNA标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤3)中,使总RNA测定体积为200μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLStrandBrite 绿色工作溶液。

4.2在室温下孵育反应2至5分钟,避光。

4.3使用荧光分光光度计在Ex / Em = 490 / 545nm(515nm处的截止值)下观察荧光增加。

注意:为尽量减少光漂白,请保持所有样品的荧光测量时间不变。

4.4空白孔中的荧光(仅含测定缓冲液)用作对照,并从具有RNA标准品或测试样品的那些比色皿的值中减去。根据RNA标准曲线确定样品的RNA浓度。

 

参考文献

Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247

Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444

Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010

Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933

Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95

Quantification of dsDNA using the Hitachi F-7000 Fluorescence Spectrophotometer and PicoGreen dye
Authors: Moreno LA, Cox KL.
Journal: J Vis Exp. (2010)

Development and characterization of a novel host cell DNA assay using ultra-sensitive fluorescent nucleic acid stain “PicoGreen”
Authors: Ikeda Y, Iwakiri S, Yoshimori T.
Journal: J Pharm Biomed Anal (2009): 997

Enhanced DNA dynamics due to cationic reagents, topological states of dsDNA and high mobility group box 1 as probed by PicoGreen
Authors: Noothi SK, Kombrabail M, Kundu TK, Krishnamoorthy G, Rao BJ.
Journal: FEBS J (2009): 541

Factors affecting quantification of total DNA by UV spectroscopy and PicoGreen fluorescence
Authors: Holden MJ, Haynes RJ, Rabb SA, Satija N, Yang K, Blasic JR, Jr.
Journal: J Agric Food Chem (2009): 7221

Label-free DNA sequence detection with enhanced sensitivity and selectivity using cationic conjugated polymers and PicoGreen
Authors: Ren X, Xu QH.
Journal: Langmuir (2009): 43

 

相关产品

产品名称 货号
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 高选择性 Cat#17657
StrandBrite 绿色荧光RNA定量试剂盒 Cat#17656

可电离脂质的应用——RNA 递送

可电离脂质的应用——RNA 递送

可电离脂质是一类有机脂质分子,在生理 pH 值下呈中性,在酸性 pH 值下呈质子化 (+)。可电离的脂质与磷脂、胆固醇和聚乙二醇化脂质一起构成脂质纳米颗粒 (LNP) 的结构

可电离脂质在 LNP 中发挥作用,可保护 RNA 免受水解、核酸酶、pH 突然变化和氧化损伤的降解,以促进其胞质转运(图 1)。本质上,可电离脂质有助于促进 RNA 递送至靶细胞。

可电离脂质的应用——RNA 递送

图 1:LNP 复合物中的可电离脂质发挥作用,促进 mRNA 胞质转运至靶细胞中。

从结构上看,目前有五种主要的可电离脂质类型广泛用于 RNA 递送;不饱和、多尾、聚合、可生物降解和支化尾(表 1)。

不饱和可电离脂质通过增加双层脂质形成非双层相的倾向来增强膜破坏,以及随后的有效负载释放。双层脂质的这种转变趋势是尾部饱和度从 0 个顺式双键增加到 2 个顺式双键的结果。例如,MC3(表 1,第 1 行)的每个尾部都有两个顺式双键,MC3证明了不饱和可电离脂质能够增强 LNP 将 RNA 递送至靶细胞的能力,从而重新点燃了治疗学中 RNA 递送的热情,特别是 mRNA 疫苗。

多尾可电离脂质通过产生增加尾部区域横截面积的锥形 LNP 结构来增强内体破坏以及随后的 RNA 递送。因此,在使用此类脂质的同时优化 LNP 结构可以提高 RNA 效力。例如,C12-200(表 1,第 2 行)是一种多尾离子化脂质,与标准制剂相比,mRNA 表达量增加了 7 倍。这种使用多尾可电离脂质的优化配方被用于各种 mRNA 递送目的,特别是产前蛋白质替代疗法。

聚合可电离脂质通过疏水聚集增强颗粒形成,从而增强 RNA 递送。这种通过疏水聚集的增强是通过将游离胺取代到具有烷基尾部的阳离子聚合物上来实现的。例如,G0-C14(表 1,第 3 行)通过赋予肿瘤中各种 RNA 治疗剂的高积累/效力和有效转染,证明了 LNP 在癌症治疗中的前景。

可电离脂质的应用——RNA 递送

可生物降解的电离脂质可减少细胞内 RNA 成功递送后的持续积累和毒性。这对于需要重复给药的 RNA 疗法尤其重要。这种降低的毒性是通过包含酯键来实现的,因为它们在生理pH下稳定,但在组织和细胞内会水解。例如,L319(表 1,第 4 行)是通过用酯键替换每个MC3尾部中的一个双键而制成的。这保持了 RNA 有效负载的效力,同时显示出宿主更好的耐受性。

支尾可电离脂质通过增强内体逃逸和增加脂质尾部的横截面积来增加 RNA 递送效力。由于 RNA 递送的多方面增强,支尾可电离脂质可有效递送大型 mRNA 构建体,用于蛋白质补充和碱基编辑疗法等。例如,FTT5(表 1,第 5 行)展示了具有酯链的支尾可电离脂质如何比其线性类似物具有更高的转染效率。与直链尾巴相比,支链尾巴的这种较高效率可能是由于支链可电离脂质上存在的仲酯的降解速率较慢。

作为脂质供应商,BroadPharm提供多种可电离脂质,例如ALC-0315类似物、SM-102类似物、MC3C12-200等,为我们的客户在纳米颗粒药物输送方面的高级研究提供支持。

用于 DNA 和 RNA 测序的 CleanPlex 扩增子测序

用于 DNA 和 RNA 测序的 CleanPlex 扩增子测序

CleanPlex ®是一种超可扩展且超灵敏的NGS 扩增子测序技术。它具有高度先进的专有多重 PCR 引物设计算法、极其均匀的多重 PCR 扩增化学物质 和 创新的背景清洁化学物质。它们共同使得 CleanPlex 即用型和定制 NGS 面板能够突破传统的基于扩增子和基于混合捕获的目标富集技术的限制。


功能亮点:

  • 超高的扩增均匀性和超低的PCR背景噪音(更准确的变异调用或更低的测序成本)

  • 单管 3 小时工作流程,手动操作时间最少(轻松自动化)

  • 兼容困难样品(降解的FFPE DNA、FFPE RNA、cfDNA、cfRNA)和主要测序平台(Illumina、Ion Torrent、Genapsys、MGI DNBSeq)

  • 高的灵敏度(低至单细胞水平直接扩增*)

  • 出色的面板大小可扩展性,单个多重 PCR 池中的扩增子数可达 20,000 多个

  • 检测和分析单核苷酸变异(SNV)、小插入和缺失(Indels)、拷贝数变异(CNV)、基因融合/剪接变异、基因表达水平、肿瘤突变负荷(TMB)、微卫星不稳定性(MSI)、内部串联复制(ITD)等

以下是从 DNA 提取到测序数据分析的高级靶向测序工作流程(图 1)。目标富集和文库制备工作流程(步骤 2)至关重要,通常决定测序数据的质量。


用于 DNA 和 RNA 测序的 CleanPlex 扩增子测序

以下是 CleanPlex DNA 扩增子测序文库制备的典型工作流程(图 2)。 CleanPlex DNA 工作流程涉及 3 个简单步骤,每个步骤包括热循环或孵育反应,然后使用磁珠进行文库纯化。简化的方案仅需 3 小时即可完成。在步骤 1 中,在多重 PCR 反应中扩增感兴趣的靶标。在步骤 2 中,引物二聚体、非特异性 PCR 产物和复杂的分子碎片在具有创新和专有 CleanPlex 背景清洁化学的消化反应中被生化去除。在步骤 3 中,通过 PCR 索引反应为文库添加样本索引条形码。输入材料可以是基因组 DNA 和从 FFPE、新鲜/冷冻组织或血液活检中提取的 DNA。通过在前面添加逆转录步骤,输入材料也可以是RNA。 (图3)

用于 DNA 和 RNA 测序的 CleanPlex 扩增子测序

synvolux:RNA转染试剂SR-2003


synvolux:RNA转染试剂

简要描述:synvolux:RNA转染试剂(SAINT-sRNA)RNA transfection reagent

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 货号 SR-2003-02
供货周期 一个月 应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,制药

synvolux:RNA转染试剂(SAINT-sRNA)RNA transfection reagent

  • SAINT-RED 的改进版、PBS 兼容版本

  • 快速简单的实验方案

  • 使用低 siRNA 浓度进行高效转染

  • 低毒

  • 血清兼容

  • 全合成转染试剂

  • 无 RNase 生产

  • 适用于高通量筛选



synvolux:RNA转染试剂SR-2003synvolux:RNA转染试剂SR-2003

SAINT-sRNA 转染试剂是一种全合成的阳离子和中性脂质的专有无毒配方,可与小 RNA(例如 siRNA 和 miRNA 模拟物或抑制剂)形成带正电荷的复合物,并能够高效地将小 RNA 递送到各种细胞中。哺乳动物细胞系。有效下调靶基因需要最少量的 siRNA。使用 SAINT-sRNA 的转染过程非常简单:只需将试剂与 siRNA 或 miRNA 混合,孵育并将复合物移至细胞上。 SAINT-sRNA 转染试剂 (1 ml) 足以在 24 孔板中进行最多 200 次转染,或在 96 孔板中进行最多 1000 次转染。

产品保质期

SAINT-sRNA在4°-7°C下保存,开封后至少可稳定一年。

synvolux:RNA转染试剂(SAINT-sRNA)RNA transfection reagent

RNA 定量的最佳技术介绍

RNA 定量的最佳技术介绍

RNA 和 DNA 定量(有时称为核酸定量)可确定给定样品中 RNA 或 DNA 的浓度。定量过程的一部分可能涉及处理混合物样品,可能含有多种污染物,例如蛋白质、其他核酸或有机化合物。

什么是RNA定量?

有多种实验方法可用于 RNA 定量。其中包括用于 RNA 定量、荧光或分光光度测量的 PCR 方法。 

用于RNA 定量的分光光度法和荧光法比 PCR 等方法具有多个优势。使用光学方法进行 RNA 定量不需要任何额外的样品制备,非常经济高效且耗时较少。虽然基于 PCR 的方法可以提供良好的灵敏度,但它们更复杂且执行成本更高,并且只有极低 RNA 浓度的 RNA 定量才需要这种水平的灵敏度。 

分光光度法和荧光分析

分光光度测量提供了一种稳健且直接的 RNA 定量方法。RNA 定量通常在 260 nm 下进行,同时还会收集 UV 范围内的一系列波长。大多数蛋白质、小有机分子和核酸在该区域具有很强的吸收和发射特征,从而可以对 RNA 进行定量并识别潜在污染物。

在已知光程下测量的样品吸光度与该样品的浓度成正比。在特定波长(RNA 为 260 nm)下透过样品的光量可用于 Beer-Lambert 方程来计算感兴趣样品的浓度,在本例中用于 RNA 定量。还必须知道感兴趣物种的摩尔吸收系数。

计算摩尔吸收系数相对简单。由于给定波长下的吸光度和光程之间的关系与浓度成线性比例,因此可以测量参考样品的一系列给定稀释度。通过对这些数据点进行线性拟合,可以计算摩尔吸收系数并用于将来的量化。对于 DNA 和 RNA 等充分表征的样品,系数是已知的并包含在分析软件中。 

RNA 定量也可以通过荧光测量来进行荧光测量比基于吸光度的测量具有更高的灵敏度。已经开发出专为激发感兴趣的分析物而开发的检测试剂盒。即使在复杂混合物或存在污染物的情况下,这些也可用于 RNA 定量。样品的荧光量也与浓度成正比,并且可以通过使用已知浓度的类似样品的标准曲线来定量。 

用于 RNA 定量的分光光度计

DeNovix 是生物技术专家,拥有多种针对 RNA 定量进行优化的仪器,包括 DS-11 系列和 QFX 荧光计,这些仪器在设计时考虑了 RNA 定量的一些复杂性。

QFX 荧光计具有出色的灵敏度和特异性,适用于可能涉及高度复杂的混合物或需要在极低浓度下进行 RNA 定量的挑战性 RNA 定量情况。它配备了四个光源和带有敏感光电二极管的发射通道,所有这些都可以选择用于药理学应用的安全审计跟踪记录。 

DS -11 系列是一款适用于常规样品和珍贵样品的微量仪器。DS-11 可以处理小至一微升的体积,并在最宽的可用动态范围内进行定量。DS-11 还配备了易于使用的软件,可以显示全光谱扫描以及通常用作 RNA 定量和质量控制一部分的 260/280 和 260/230 比率。

使用 RNA 测序对细胞类型进行分类

使用 RNA 测序对细胞类型进行分类

RNA 测序 (RNA-seq) 是一项革命性技术,改变了基因组学领域。它为研究人员揭示细胞和分子水平上发生的许多复杂过程开辟了新途径。与 DNA 测序不同,RNA-seq 通过提供任何给定时间所有活性基因的快照来深入了解基因组的功能元件。那么,这如何帮助用户对不同的细胞类型进行分类呢?请继续阅读以了解更多信息。

RNA 测序在细胞类型分类中的威力

RNA 测序已成为细胞类型分类的强大工具。它使科学家能够识别特定的细胞类型并了解它们在各种生物过程中的作用。这是因为 RNA-seq 能够分析单个细胞中的基因表达水平。许多研究领域都将从这种开创性的方法中受益,但它在研究肺纤维化等疾病方面已经显示出非凡的潜力,在这些疾病中,不同细胞群的作用尚未全了解。

单细胞 RNA 测序:游戏规则改变者

单细胞 RNA 测序 (scRNA-seq) 将 RNA 测序提升到一个新水平。它使科学家能够分析单个细胞的转录组,提供细胞类型和状态的高分辨率视图。与传统的 RNA 测序方法相比,这是一个重大进步,传统的 RNA 测序方法提供大量细胞的平均基因表达谱。

在最近一项题为“单细胞 RNA 测序揭示肺纤维化中不同上皮和间质谱系的促纤维化作用“的研究中,scRNA-seq 被用来揭示肺纤维化的复杂细胞景观。该研究使用 10x Genomics Chromium 平台进行单细胞 RNA 测序,该平台生成乳液中的单细胞凝胶珠 (GEM),用于逆转录过程以创建 cDNA。然后对该 cDNA 进行扩增并用于测序。

DeNovix 在 RNA 测序中的作用

DeNovix DS-11 FX+ 分光光度计/荧光计在这项研究中发挥了至关重要的作用。该仪器用于定量 RNA,这是 RNA 测序过程中的关键步骤。RNA的定量确保了测序过程有足够的材料,并有助于保证样品的质量。这是 10x Genomics 平台单细胞 RNA 测序的准备步骤。

细胞计数是 RNA 测序的另一个重要准备步骤。在一项相关研究“模拟人类肺细胞暴露于野火中发现异常的 lncRNA 特征“中,DeNovix CellDrop™ 系统用于在 0.4% 台盼蓝 1:1 稀释液中对人类永生化支气管气管细胞 (AALE) 进行计数,并在其死亡前 24 小时进行计数。直接烟雾暴露(DSE)。暴露于气液界面 (ALI) 室后,细胞用于 RNA 测序分析,以识别 IncRNA 的变化。结果表明烟雾成分对于野火烟雾的分子效应的重要性。具体来说: 

“我们的结果阐明了化学成分(以及地理来源)在评估野火烟雾暴露可能导致的呼吸系统健康风险方面的重要性。我们使用通过实验生成的 RNA-seq 数据进行公正的分析,旨在识别差异表达的转录本,在这里,通过严格和全局的分析,我们证明不同的野火烟雾会诱导 lncRNA 的异常表达。”

机器学习和 RNA 测序

机器学习是另一种越来越多地与 RNA 测序结合使用的工具。通过训练已知细胞类型的数据,机器学习算法可以根据细胞类型的基因表达谱对细胞类型进行分类。这可以大大提高细胞类型分类的准确性和效率。

RNA测序的应用

RNA-seq 的应用广泛且多样。从了解疾病中细胞群的复杂性到发现选择性剪接变体,RNA-seq 是现代基因组学库中的多功能工具。

RNA 测序的未来

随着新技术和方法的不断开发,RNA测序的未来是光明的。对不同 RNA 分子及其表达水平的研究不断增长,这将与 RNA-seq 的进步契合,并扩大我们可以理解的细胞类型的数量。 

在 DeNovix,我们很自豪能够成为这个令人兴奋的领域的一部分。我们邀请您探索我们的产品和服务范围,并与我们一起突破 RNA 测序的可能界限。使用我们的组合分光光度计/荧光计和开创性的自动细胞计数器,用户可以优化 RNA 测序的准备步骤,以保证最高的质量。我们可以一起继续解开细胞的秘密,并在分子水平上增进我们对生命的理解。

细胞RNA分离试剂盒(Cell RNA Isolation Kit)TBS6001


细胞RNA分离试剂盒(Cell RNA Isolation Kit)

简要描述:细胞RNA分离试剂盒(Cell RNA Isolation Kit)Tribo细胞RNA分离试剂盒旨在从多达200个样本的培养细胞中分离总RNA。上海金畔生物科技有限公司专业提供一站式实验产品,欢迎咨询!

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品牌 其他品牌 货号 TBS6001
供货周期 一个月

细胞RNA分离试剂盒(Cell RNA Isolation Kit)

高质量RNA的分离是基因表达研究中重要的第一步,如RT-PCR、qRT-PCR和阵列分析。Tribo细胞RNA分离试剂盒旨在从多达200个样本的培养细胞中分离总RNA。该试剂盒可以显著提高RNA的数量和质量。

应用程序:

直接分析:从培养细胞中分离总RNA。

主要特点:

简单方便:不需要特殊设备。
高产率:该方法比旋转柱法获得更高的RNA产率。
多功能性:多种RNA包括微小RNA。

储存条件:

该套件在室温下运输。将试剂储存在4℃下。
保质期:收货后12个月。

Tribioscience是一家专注于为生命科学研究实验室和公司提供试剂的生物技术公司,是一家私人控股的生物技术公司,由斯坦福大学的一群科学家于2010年创立。公司专注于为分子生物学、生物化学、免疫学、传染病、基因治疗、神经科学、动物实验和药物开发领域的生命科学研究实验室和生物技术公司提供高质量的产品。产品涵盖抗体、生化测试、ELISA试剂盒、PCR及相关试剂等。我们还为生物技术行业和学术界提供CRO(研究合同组织)服务。我们的动物建模服务已被用于动物模型开发和活泼的高排名大学的评估。

细胞RNA分离试剂盒(Cell RNA Isolation Kit)

T7-划线™标准型RNA IVT试剂盒C-AS3107


T7-划线™标准型RNA IVT试剂盒

简要描述:T7-划线™标准型RNA IVT试剂盒,产品编码:C-AS3107。品牌:Bpsbioscience。
T7-Scribe™ Standard RNA IVT Kit

详细介绍

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

T7-划线™标准型RNA IVT试剂盒,产品编码:C-AS3107。品牌:Bpsbioscience。

T7-划线™标准型RNA IVT试剂盒,T7-Scribe™ Standard RNA IVT Kit

产品描述:

用于使用 T7 RNA 聚合酶和规范 (GAUC) NTP 生产体外转录 RNA。反应在 2 小时内从 1 μg DNA 产生 150 μg RNA。


海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。

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  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

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