3D 和 2D 细胞采集 – VitroGel 中细胞采集的工作原理

3D 和 2D 细胞采集 – VitroGel 中细胞采集的工作原理

从大多数水凝胶基质中收获细胞并不是一件容易的事。使用刺激性化学溶液、强酶或改变温度可能会损坏您的细胞。这些方法的细胞回收率较低。

使用 VitroGel 系统,从水凝胶基质中收获细胞就像进行 3D 细胞培养一样简单。使用我们的无酶VitroGel® 细胞恢复解决方案,科学家可以在中性 pH 值和 37°C 的操作温度下恢复细胞。该溶液可以在恢复过程中保持高细胞活力。细胞恢复后可以在 2D 和 3D 培养物中进行传代培养。

VitroGel 细胞恢复溶液有助于从水凝胶基质中释放离子分子,将固体水凝胶转化回软水凝胶状态。在此状态下,水凝胶保持剪切稀化特性;它可以通过一点机械破坏(例如摇动或摇动管)和稀释进一步转化为液态。一旦水凝胶溶解为液体形式,就可以通过离心收获细胞。

3D 和 2D 细胞采集 – VitroGel 中细胞采集的工作原理

技术提示:

  • 保持溶液温暖:在整个过程中,将细胞恢复溶液和混合物保持在 37°C 温度非常重要。温暖的温度对于加速分子交换以从固体水凝胶中释放离子分子至关重要,固体水凝胶可以转变为软水凝胶。

  • 施加机械力:机械力,例如摇动或摇动离心管,或使用血清学移液管与细胞回收溶液混合水凝胶有助于将水凝胶转化为液态。

  • 稀释:以水凝胶体积 10 倍或更高的体积添加细胞回收溶液,使溶解的水凝胶保持液态。

  • 室温离心

VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法

VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法

XENO-FREE 生物功能 VitroGel 水凝胶系统适用于许多 3D 细胞培养和应用。选择“即用型”水凝胶系统来优化配方和简单的操作过程,或者选择高浓度水凝胶系统,通过“混合与匹配”和水凝胶的调整来创建定制的微环境。有多种方法可以使用我们的水凝胶系统来满足许多研究需求。为了展示我们的水凝胶的灵活性,我们列出了五种可以使用我们的水凝胶进行的常规细胞培养方法:3D 细胞培养、2D 水凝胶涂层、静态悬浮培养、水凝胶细胞珠以及作为可注射载体。这五种培养方法适用于我们所有即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。用这些方法培养的细胞可以很容易地收获VitroGel® 细胞恢复解决方案用于下游分析或传代培养。


VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法

3D 细胞培养

VitroGel 系统是 3D 细胞培养的理想选择。只需在室温下将 VitroGel 溶液与细胞悬浮液混合,转移到培养板并添加顶部培养基,细胞就可以进行孵育。这种 3D 培养方法实现了完整的细胞封装,从而增强了细胞与水凝胶基质的相互作用。许多下游分析,如药物筛选、免疫荧光分析和细胞毒性测定,可以直接在水凝胶中进行。

VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法

二维水凝胶涂层

2D 水凝胶涂层方法非常适合在传统 2D 培养和 3D 细胞封装培养之间架起桥梁。通过在室温下将 VitroGel 溶液与细胞培养基混合并转移至培养板,可以将 VitroGel 作为厚层水凝胶涂覆在培养板的底部。细胞可以直接添加到水凝胶的顶部。 2D 水凝胶涂层方法允许细胞与功能性水凝胶物质相互作用/浸入其中,并保持将表面暴露于顶部介质的性能。当细胞在水凝胶表面迁移/聚集时,会发生快速细胞球体形成。 2D 水凝胶涂层方法可作为与 3D 细胞培养方法结合的替代共培养方法:将一种细胞类型封装在水凝胶中进行 3D 培养,然后在水凝胶顶部添加另一种类型的细胞作为 2D 涂层培养。 2D 涂层 VitroGel 还可以成为研究细胞侵袭、血管生成测定和逐层共培养的强大系统。除了 2D 厚凝胶涂层外,VitroGel 还可以稀释用于薄凝胶涂层方法。

VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法

静态悬浮培养

3D静态悬浮培养方案是VitroGel水凝胶系统的培养方法。通过简单地将 VitroGel 溶液和细胞混合形成软水凝胶,研究人员可以进一步直接将水凝胶-细胞混合物与额外的培养基混合,制成水凝胶-细胞悬浮液。水凝胶基质分散在细胞培养基中可以增加整个混合物的粘度,并帮助细胞在不需要强烈搅拌的情况下保持悬浮状态。 3D静态悬浮培养物易于制备,并且通过简单地改变水凝胶和细胞培养基的混合比例,可以灵活地调整各种细胞类型和接种密度的最终粘度。例如,研究人员可以使用固定的2:1(水凝胶溶液:细胞,v/v)来制备水凝胶-细胞混合物,然后将其与细胞培养基以1:1至1:10的比例混合,以获得不同粘度的水凝胶-细胞混合物。最终的水凝胶细胞悬浮液。这种培养方法可轻松用于实验室规模或大型工业规模的细胞培养规模扩大。研究实验室不需要花哨的生物反应器或昂贵的培养容器。我们将其用于干细胞球体HEK293 球体的生成。该方法还适用于我们所有即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。 VitroGel 静态悬浮培养产生的细胞可以通过离心轻松收获。

VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法



水凝胶细胞珠

作为一种可注射水凝胶系统,VitroGel 具有剪切稀化和快速恢复流变特性。水凝胶溶液可以与细胞混合形成软水凝胶,然后可以将其作为液滴添加到细胞培养基中以形成水凝胶-细胞珠。这种培养方法不仅将细胞封装在水凝胶基质内以增强细胞与基质的相互作用,而且还允许整个水凝胶-细胞珠悬浮在细胞培养基中以获得最佳的培养基渗透。研究人员可以通过改变添加到培养基中的液滴的体积来调整水凝胶珠的大小。对于需要牢固附着才能生长的细胞,如间充质干细胞 (MSC),这种水凝胶细胞珠培养方法是替代微载体进行 3D 细胞放大的方法。由于具有优良的介质和氧气渗透性,在水凝胶珠中培养的细胞可以在长期培养中保持高细胞活力。该方法适用于我们所有即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。 VitroGel 水凝胶细胞珠培养物产生的细胞可以通过 VitroGel 细胞回收溶液收获。

VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法

可注射载体

VitroGel 是一种出色的动物注射用注射载体。在机械剪切力(例如通过注射器注射)的作用下,水凝胶发生凝胶-溶胶转变并变成自由流动状态。然而,一旦剪切力停止,水凝胶的机械强度可以通过溶胶-凝胶转变迅速恢复并再次变成水凝胶状态。凭借这种可注射特性,VitroGel 可用于 体内细胞/药物递送,以进行细胞治疗或控释。只需在室温下将水凝胶溶液与细胞/化合物混合,水凝胶即可在 20 分钟内准备好注射。除了即用型 VitroGel 之外,研究人员还可以使用 VitroGel 高浓度水凝胶来获得不同水凝胶强度的可注射水凝胶。

VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法


VitroGel 水凝胶中的胶凝作用如何发挥作用?

VitroGel 水凝胶中的胶凝作用如何发挥作用?

第一阶段:

 

VitroGel 溶液在室温下稳定且可自由流动。水凝胶凝胶化/形成始于将 VitroGel 溶液与细胞培养基混合。水凝胶分子与细胞培养基中的 Ca2+ 和 Na+ 等离子分子相互作用,形成基质结构(水凝胶)。

 

当使用少量离子分子时,水凝胶形成过程很慢。在此阶段,水凝胶柔软,具有剪切稀化和快速恢复的机械性能,这使得水凝胶易于转移到培养板或用于注射。
第二阶段:
 
软水凝胶形成后,在水凝胶顶部添加额外的细胞培养基将使更多的离子分子渗透到水凝胶基质中并进一步使水凝胶交联饱和。在此过程中会形成固体水凝胶。

VitroGel 水凝胶中的胶凝作用如何发挥作用?

VITROGEL 水凝胶系统详细介绍

VITROGEL 水凝胶系统详细介绍

VITROGEL ®是一种不含异种物质的生物功能水凝胶系统

我们先进的水凝胶系统密切模仿天然细胞外基质 (ECM) 环境,在生物功能和操作简便性之间实现了出色的平衡,以建立稳健的 3D 细胞培养平台和可注射输送系统,以推进药物发现、组织工程、细胞疗法和个性化医疗。

基于动物的基底膜已知批次间不一致,并且有超过 2,000 种未定义的成分。相比之下,VitroGel 系统是一种定义明确的合成水凝胶,具有功能性配体修饰,不含动物或人类化合物。VitroGel 系统提供强大的水凝胶特性,具有可控的机械强度、功能性配体和可降解性。研究人员可以控制整个水凝胶系统,为许多不同的应用创造仿生环境 (ECM)。

应用
无异源系统是临床应用中 3D 细胞培养的关键。我们的水凝胶可实现高通量处理,以从细胞系和患者来源的细胞中建立 3D 器官模型。使用我们的水凝胶系统作为可注射的输送系统,科学家们可以在细胞治疗中实现更好的细胞保留和更高的细胞活力。这种突破性的技术使得从 3D 水凝胶基质中回收细胞比以往任何时候都更容易。我们的产品可以在 cGMP 下生产,并为临床应用打开大门。

VitroGel 水凝胶的特点
密切模仿天然细胞外基质 (ECM) 环境,这种系统具有许多优势,可以通过 3D 细胞培养及其他方式桥接体外体内研究。

VITROGEL 水凝胶系统详细介绍

VitroGel ®即用型水凝胶
JUST ADD CELLS
一系列用户友好的功能性水凝胶,在简单性和多功能性之间实现了出色的平衡。

即用型 VitroGel 水凝胶优化了多功能配体和浓度配方,以支持广泛的细胞类型,用于不同的应用,包括各种 3D 细胞模型、干细胞球体和类器官。每个水凝胶都可以直接与细胞悬液混合。无需额外调整。对于许多用户来说,这是用于 3D 细胞培养和 2D 涂层的优质水凝胶。

VitroGel ®高浓度水凝胶
3D 细胞培养随心所欲!
可调水凝胶——无限创造力和最大灵活性的基石

VitroGel 高浓度水凝胶提供一组构建块来创建一个功能性微环境,该微环境密切模仿天然细胞外基质 (ECM),让细胞感觉像在家里一样。高浓度配方允许最大的灵活性来控制 10 至 4000 Pa 的水凝胶机械强度。水凝胶具有多种类型的功能性配体修饰,例如 RGD (VitroGel RGD)、胶原蛋白 (VitroGel COL)、层粘连蛋白 (VitroGel IKVAV & VitroGel YIGSR) 和可生物降解的基质金属蛋白酶 (VitroGel MMP)。该系统允许科学家研究细胞行为以响应单个功能配体或通过混合不同版本的 VitroGel 创建多功能水凝胶组合。

VitroGel 水凝胶的多种 3D 细胞培养方法和应用

VitroGel 水凝胶的多种 3D 细胞培养方法和应用

使用 VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法

XENO-FREE 生物功能 VitroGel 水凝胶系统适用于许多 3D 细胞培养和应用。选择“即用型”水凝胶系统以优化配方和简化操作流程,或选择高浓度水凝胶系统,通过“混合搭配”和调整水凝胶来创建定制的微环境。有多种方法可以使用我们的水凝胶系统来满足许多研究需求。为了展示我们水凝胶的灵活性,我们列出了五种流行的可以使用我们的水凝胶进行的细胞培养方法:3D 细胞培养、2D 水凝胶涂层、静态悬浮培养、水凝胶细胞珠和作为可注射载体。这五种培养方法适用于我们所有的即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。用这些方法培养的细胞可以很容易地用用于下游分析或传代培养的VitroGel® 细胞回收溶液。

VitroGel 水凝胶的多种 3D 细胞培养方法和应用

3D 细胞培养

VitroGel 系统是 3D 细胞培养的理想选择。只需在室温下将 VitroGel 溶液与细胞悬液混合,转移到培养板并添加顶部培养基,细胞就可以进行孵育了。这种 3D 培养方法进行了完整的细胞封装,从而增强了细胞-水凝胶基质的相互作用。许多下游分析,如药物筛选、免疫荧光分析和细胞毒性测定,可以直接在水凝胶中进行。

VitroGel 水凝胶的多种 3D 细胞培养方法和应用

二维水凝胶涂层

2D 水凝胶涂层方法是在传统 2D 培养和 3D 细胞封装培养之间架起桥梁。通过在室温下将 VitroGel 溶液与细胞培养基混合并转移到培养板中,VitroGel 可以在培养板底部涂上一层厚厚的水凝胶。细胞可以直接添加到水凝胶的顶部。二维水凝胶涂层方法允许细胞与功能性水凝胶物质相互作用/浸入功能性水凝胶物质中,并保持表面暴露于顶部介质。当细胞在水凝胶表面迁移/聚集时,可能会快速形成细胞球体。2D 水凝胶涂层方法可用作与 3D 细胞培养方法相结合的替代共培养方法:将一种细胞类型封装在水凝胶中用于 3D 培养,然后在水凝胶顶部添加另一种类型的细胞作为 2D 涂层培养。二维涂层 VitroGel 也可以成为研究细胞侵袭、血管生成测定和逐层共培养的强大系统。除了 2D 厚凝胶涂层外,VitroGel 还可以稀释用于薄凝胶涂层方法。

VitroGel 水凝胶的多种 3D 细胞培养方法和应用

静态悬浮文化

3D 静态悬浮培养方案是 VitroGel 水凝胶系统的培养方法。通过简单地将 VitroGel 溶液和细胞混合形成软水凝胶,研究人员可以进一步直接将水凝胶-细胞混合物与额外的培养基混合,制成水凝胶-细胞悬浮液。水凝胶基质分散在细胞培养基中可以增加整个混合物的粘度,帮助细胞在没有强烈搅拌的情况下保持悬浮状态。3D 静态悬浮培养易于制备,可灵活调整各种细胞类型和接种密度的最终粘度,只需改变水凝胶和细胞培养基的混合比例即可。例如,研究人员可以使用固定的2:1(水凝胶溶液:细胞,v/v)配制水凝胶-细胞混合物,然后将其与细胞培养基按1:1至1:10的比例混合,得到不同粘度的最终的水凝胶细胞悬液。这种培养方法可以很容易地用于实验室规模或大型工业规模的细胞培养放大。研究实验室不需要花哨的生物反应器或昂贵的培养容器。我们将其用于干细胞球体HEK293 球体的生成。该方法也适用于我们所有的即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。VitroGel 静态悬浮培养产生的细胞可通过离心轻松收集。

VitroGel 水凝胶的多种 3D 细胞培养方法和应用

水凝胶细胞珠

作为一种可注射的水凝胶系统,VitroGel 具有剪切稀化和快速恢复流变特性。水凝胶溶液可以与细胞混合形成软水凝胶,然后可以将其作为液滴添加到细胞培养基中,形成水凝胶细胞珠。这种培养方法不仅将细胞封装在水凝胶基质中以增强细胞-基质相互作用,而且还允许整个水凝胶-细胞珠悬浮在细胞培养基中以实现最佳培养基渗透。研究人员可以通过改变添加到培养基中的液滴体积来调整水凝胶珠的大小。对于需要牢固附着才能生长的细胞,例如间充质干细胞 (MSC),这种水凝胶细胞珠培养方法是替代微载体进行 3D 细胞放大的方法。由于优良的介质和氧气渗透性,在水凝胶珠中培养的细胞可以保持长期培养的高细胞活力。该方法适用于我们所有的即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。VitroGel 水凝胶细胞珠培养产生的细胞可以通过 VitroGel 细胞回收溶液收集。

VitroGel 水凝胶的多种 3D 细胞培养方法和应用

注射载体

VitroGel 是一种出色的动物注射载体。在通过注射器注射等机械剪切力作用下,水凝胶发生凝胶-溶胶转变,成为自由流动状态。然而,一旦剪切力停止,水凝胶的机械强度可以迅速恢复,并发生溶胶-凝胶转变,再次成为水凝胶状态。凭借这种可注射特性,VitroGel 可用于 细胞治疗的体内细胞/药物递送或控释。只需在室温下将水凝胶溶液与细胞/化合物混合,水凝胶即可在 20 分钟内用于注射。除了即用型 VitroGel,研究人员还可以使用 VitroGel 高浓度水凝胶来获得不同水凝胶强度的可注射水凝胶。

VitroGel 水凝胶的多种 3D 细胞培养方法和应用