Western Blot(免疫印迹,简称WB)法是利用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出专一目的蛋白。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的蛋白转移到硝酸纤维素膜上,膜以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及免疫原性。一抗特异地与蛋白上的抗原决定簇结合,然后用二抗检测已结合上去的抗体。再加入底物进行显色或发光,从而实现对目的蛋白进行定性或定量检测。该技术已广泛应用于检测蛋白水平的表达。
Western Blot的优点是灵敏度高,可达ng级,用化学发光显色法可达pg 或fg级,方便,特异性高。经典的Western Blot 包括蛋白电泳—转膜—封闭—抗体—显色等五个步骤。
Western Blot 实验要得到一个优质的实验图片,除了与使用高质量的一抗、二抗以外,还与后期的检测系统的灵敏度有很重要的关系。Western Blot目前使用最多的是化学发光显色,当然也有采用普通沉淀型底物进行比色法分析,或者使用荧光二抗进行的荧光法检测也越来越受欢迎。上海金畔生物科技有限公司代理的KPL公司为您提供各种检测方法,各种灵敏度的WB显色底物,可以满足您不同的实验需求。
上海金畔现货供应KPL公司Western Blot (WB)底物产品信息
检测方法
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酶
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热销度
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品名
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货号
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组分
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膜张数 (10cm2)
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颜色
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灵敏度 (HRP g/ml)
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化
学
发
光
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HRP
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AAAAA
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LumiGLO 2-C
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54-61-00
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2*120 ml(A液+B液)
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240
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–
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(pg)10-12
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AAA
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LumiGLO Reserve 3-C
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54-71-02
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1*17 mL A液,1*34 mL B液,1*100 mL 20X洗脱液
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100
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–
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(pg~fg)
10-15~10-12
|
AAA
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LumiGLO Ultra 2-C
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54-51-00
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2*25 ml(A液+B液)
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100
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–
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(fg)10-15
|
AP
|
AA
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PhosphaGLO 1-C
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55-60-03
|
1* 30 mL
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60
|
–
|
(pg)10-12
|
AA
|
PhosphaGLO Reserve 1-C
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55-60-01
|
1*30 mL
|
60
|
–
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(fg)10-15
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比
色
法
|
HRP
|
AAAA
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TMB 1-C
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50-77-18
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1* 100 mL
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100
|
深蓝色
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(pg)10-12
|
AAA
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TMB Membrane System 3-C
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50-77-00
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4*100 ml(A液+B液) 1*40 ml增强剂
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400
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深蓝色
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(ng)10-9
|
AP
|
AAA
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BCIP/NBT 1-C
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50-81-18
|
1* 100 mL
|
100
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蓝紫色
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(ng~pg)
10-12~10-9
|
AAA
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BCIP/NBT System 2-C
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50-81-00
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2*100 ml(A液+B液) 1*100 ml缓冲液
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200
|
蓝紫色
|
(ng~pg)
10-12~10-9
|
AAA
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FirePhos 1-C
|
50-81-30
|
1* 100 mL
|
100
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红色
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(ng~pg)
10-12~10-9
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LumiGLPeroxidase Chemiluminescent Substrate是基于鲁米诺开发的一种非同位素的HRP底物,当有H2O2存在时,HRP可催化鲁米诺发光,且这个反应相当迅速。该底物检测信号与被检蛋白浓度呈非常好的正相关关系,灵敏度高达pg级别。此外,反应物可从膜上洗去,然后重新加入底物反应,如此进行实验结果的优化而不再需要重复全部WB过程。LumiGLO Reserve是对LumiGLO的第二代升级产品,可检测pg-fg级(HRP g/ml),LumiGLO Ultra则是第三代产品,信号超强,能检测fg级。
产品特点:
1.既可用于WB又可用于ELISA;
2.信号产生迅速;
3.灵敏度高,是同类产品的2倍以上
4.全部试剂均为即用型的,使用方便;
5.工作液可存放8~24h;
6.发光时间长,可持续1~2小时;
7.可于2~8℃稳定保存1年以上。
KPL是世界上很大的二抗和底物显色系统生产商,也是世界上很早实现亲和纯化二抗商业化的生物公司。 KPL拥有近 40 年的产品研发经验, 通过ISO 9001 质量体系认证,所有产品具有质量批间差小,品质可靠,高纯度、高灵敏度、高信噪比 (信号强、背景低)等特点,成为深受广大诊断企业好评。
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