FITC-xtra 异硫氰酸荧光素-AAT Bioquest荧光染料

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FITC-xtra 异硫氰酸荧光素价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

FITC-xtra 异硫氰酸荧光素

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 526
分子量 620.52 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

FITC-xtra 异硫氰酸荧光素是美国AAT Bioquest生产的荧光素,虽然FITC是用于制备绿色荧光生物共轭物的流行的荧光标记染料,但是FITC存在某些限制,例如用于显微镜成像的严重光漂白和pH敏感荧光。与相应的FITC缀合物相比,用FITC-xtra制备的蛋白质缀合物是非常好的。FITC-xtra缀合物比FITC缀合物明显更亮,并且更加光稳定。另外,FITC-xtra的荧光不受pH(4-10)的影响。这种pH不敏感性是对FITC的重大改进,FITC仅在pH大于9时才发出其大荧光,FITC-xtra具有几乎相同FITC的光谱特性。此外,FITC-xtra在温和缀合条件下比FITC产生高得多的缀合产率。像5-FITC,FITC-xtra抗体缀合物适合于488nm激光线的激发,使其成为相应的FITC标记的抗体缀合物的替代物。在检测条件相同的情况下,FITC-xtra抗体缀合物提供比相应的FITC标记的缀合物高得多的信号/背景比。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的FITC-xtra 异硫氰酸荧光素。 

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实验方案

实验方案

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(例如,1M碳酸钠溶液或1M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(例如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合,得到1 mL蛋白标记储备液。 
注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。 
注2: 应将蛋白质溶于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。 
注3:若使用不纯的抗体、牛血清蛋白(BSA)和明胶稳定的抗体,则标记效果不会特别好。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得标记结果。 
注4:如果蛋白质浓度小于2mg / mL,则缀合效率明显降低。为获得标记效率,建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。
 
2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到FITC-xtra小瓶中以制备10-20mM储备溶液,通过移液或涡旋混合均匀。 

注:在开始缀合之前准备染料储备溶液(溶液B)随配随用,保证使用的溶液的新鲜。染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。溶液B可以在不受光照和潮湿的情况下储存在冰箱中两周。

 
3.准备所需的蛋白质缀合物: 

注:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能对其结合亲和力产生不利影响,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。
 
3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到蛋白质的小瓶中溶液(95μl溶液A),有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。 
注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。
3.2进行缀合反应。在有效摇动下将适量的染料储备溶液(溶液B)加入到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中。继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。
3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1; 如果需要,分别为15:1和20:1。
3.4使用预制的旋转柱或其他技术纯化所需的缀合物。
3.5计算上述4种缀合物的染料/蛋白质比(DOS)。
 
 
参考文献

Role of reactive oxygen species-mediated MAPK and NF-$kappa$B activation in polygonatum cyrtonema lectin-induced apoptosis and autophagy in human lung adenocarcinoma A549 cells
Authors: Tao Liu, Lei Wu, Di Wang, Haiyang Wang, Jinwu Chen, Chunlan Yang, Jinku Bao, Chuanfang Wu
Journal: Journal of Biochemistry (2016): mvw040

Determination of sodium benzoate in food products by fluorescence polarization immunoassay
Authors: Linlin Ren, Meng Meng, Peng Wang, Zhihuan Xu, Sergei A Eremin, Junhong Zhao, Yongmei Yin, Rimo Xi
Journal: Talanta (2014): 136–143

Complexes containing cationic and anionic pH-sensitive liposomes: comparative study of factors influencing plasmid DNA gene delivery to tumors
Authors: Yan Chen, Ji Sun, Ying Lu, Chun Tao, Jingbin Huang, He Zhang, Yuan Yu, Hao Zou, Jing Gao, Yanqiang Zhong
Journal: International journal of nanomedicine (2013): 1573

Swimming behavior of the monotrichous bacterium Pseudomonas fluorescens SBW25
Authors: Liyan Ping, Jan Birkenbeil, Shamci Monajembashi
Journal: FEMS microbiology ecology (2013): 36–44

吲哚菁绿ICG Xtra-Osu-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
吲哚菁绿ICG Xtra-Osu价格 2823
产品规格

1 mg

产品货号

吲哚菁绿ICG Xtra-Osu

产品参数
Ex (nm) 790 Em (nm) 814
分子量 1232.62 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

吲哚菁绿ICG Xtra-Osu是美国AAT Bioquest生产的Cy系列染料,吲哚菁绿(ICG)是一种用于医学诊断的花青染料。它用于确定心输出量,肝功能和肝血流量,以及用于眼科血管造影。它具有接近800nm的峰值光谱吸收。这些红外线能穿透视网膜层,使ICG血管造影成像比荧光血管造影更深的循环模式。ICG的半衰期为150至180秒,仅通过肝脏从胆汁液中排出。近的一项研究表明ICG在注射后20分钟内靶向动脉粥样硬化,并提供足够的信号增强,用于动脉粥样硬化兔子体内的脂质,发炎,冠状动脉大小的斑块的检测。离体荧光反射成像显示,与注射生理盐水的动脉粥样硬化兔相比,注射ICG的动脉粥样硬化兔的斑块靶 – 背景比高。氨基反应性ICG衍生物用于与抗体和其他生物分子制备ICG生物缀合物。所有ICG染料都需要溶解在DMSO中。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的吲哚菁绿ICG Xtra-Osu。 

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实验方案

样本标记分析

注意:该标记方案是针对山羊抗小鼠IgG与ICG的缀合物开发的。

 

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100L反应缓冲液(例如,1M碳酸钠溶液或1M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900L目标蛋白质溶液(例如抗体,蛋白质浓度> 2mg / ml,)混合,得到1 mL蛋白标记储备液。

注意1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。 如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则需使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注意2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注意3:牛血清白蛋白(BSA)、明胶稳定不纯的抗体等标记的效果不理想。 叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。 可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得标记结果。

注意4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率明显降低。 为获得标记效率,建议蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

 

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到ICG染料小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合之前准备染料储备溶液(溶液B),现配现用,保持溶液新鲜。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可以在不受光照和潮湿的情况下储存在冰箱中两周。 避免冻融循环。

 

3.确定染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能对其结合亲和力产生不利影响,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中,蛋白质溶液(95μl溶液A)。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行结合反应(见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比例(DOS)。

3.6运行上述4种缀合物的功能检测,确定的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

 

4.运行缀合反应:

4.1在有效摇动下,将适量的染料储备溶液(溶液B)加入到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中。

注意:溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。 如果跳过步骤3,我们建议使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

 

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接来自步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时,加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4将更多PBS(pH 7.2-7.4)加入所需样品中以完成柱纯化。 

注意1:对于立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注意2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥。

 

参考文献

Assessment of Lexiscan for Blood Brain Barrier disruption to facilitate Fluorescence brain imaging
Authors: Rebecca W Pak, Hanh Le, Heather Valentine, Daniel Thorek, Arman Rahmim, Dean Wong, Jin U Kang
Journal: (2017): ATu3B–2

Bioengineering of injectable encapsulated aggregates of pluripotent stem cells for therapy of myocardial infarction
Authors: Shuting Zhao, Zhaobin Xu, Hai Wang, Benjamin E Reese, Liubov V Gushchina, Meng Jiang, Pranay Agarwal, Jiangsheng Xu, Mingjun Zhang, Rulong Shen
Journal: Nature Communications (2016): 13306

Deep Photoacoustic/Luminescence/Magnetic Resonance Multimodal Imaging in Living Subjects Using High-Efficiency Upconversion Nanocomposites
Authors: Yu Liu, Ning Kang, Jing Lv, Zijian Zhou, Qingliang Zhao, Lingceng Ma, Zhong Chen, Lei Ren, Liming Nie
Journal: Advanced Materials (2016)

Single-Layer MoS2 Nanosheets with Amplified Photoacoustic Effect for Highly Sensitive Photoacoustic Imaging of Orthotopic Brain Tumors
Authors: Jingqin Chen, Chengbo Liu, Dehong Hu, Feng Wang, Haiwei Wu, Xiaojing Gong, Xin Liu, Liang Song, Zonghai Sheng, Hairong Zheng
Journal: Advanced Functional Materials (2016)

In Vitro and In Vivo Analysis of Indocyanine Green-Labeled Panitumumab for Optical Imaging A Cautionary Tale
Authors: Yang Zhou, Young-Seung Kim, Diane E Milenic, Kwamena E Baidoo, Martin W Brechbiel
Journal: Bioconjugate chemistry (2014): 1801–1810

链霉亲和素-Xtra IF488缀合物-AAT Bioquest荧光染料

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链霉亲和素-Xtra IF488缀合物价格 1386
产品规格

100 ug

产品货号

链霉亲和素-Xtra IF488缀合物

产品参数
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 ~52000 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

链霉亲和素缀合物广泛用于和生物素缀合物结合以检测多种生物靶标,例如蛋白质,核酸和其他分子。它们被用作许多生物检测的理想选择,例如免疫荧光显微镜,流式细胞术,蛋白质印迹和其他生物应用,因为链霉亲和素具有很强的亲和力结合生物素,在广泛的pH和温度范围内都不会受到影响。AAT Bioquest®提供多种标记有经典荧光染料的链霉亲和素偶联物(例如:FITC,TRITC,TexasRed®,Cy3®,Cy5®和Cy7®),以及我们优异的水溶性,光稳定性iFluor 和mFluor 染料。然而,常规的生物素-亲和素检测系统仍然受到现有荧光缀合物有限信号强度的限制。链霉亲和素Xtra iFluor缀合物是超亮链霉亲和素缀合物的新家族,其激发和发射性能与Alexa Fluor荧光团几乎相同,信号增强了3到5倍。它是在细胞成像或流式细胞仪中检测低丰度靶标的一组强大工具。iFluor 488是FITC通道成像中常见的绿色荧光色之一。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的链霉亲和素-Xtra IF488缀合物。

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 530/30 nm
通道: FITC 通道

 


荧光显微镜  
Ex: FITC滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
链霉亲和素-Xtra 储备溶液(1 mg / mL):加入100 uL的Cat#46000和1 mL的Cat#46001的ddH2O,制成1mg/mL的储备溶液。注意:此重组溶液在4°C储存并避光保存后,可稳定保存6个月而无明显变化。为了更长的存储时间,可以将重构的溶液分成单次使用的等分试样,或者不分装添加等体积的甘油(浓度为50%),然后将溶液存储在-20°C(避光)。

 

2.工作溶液配制

链霉亲和素-Xtra 工作溶液:对于IF,建议的染色浓度为1-5 ug / ml。对于FACS,建议在染色浓度为0.1-0.5 ug / 100 uL /百万细胞。注意: PBS + 0.1%BSA可用作染色缓冲液。 注意:为了获得每种应用的性能,需要仔细确定该试剂的浓度。注意:  建议的工作稀释度仅供参考,建议用户在测试中使用适当的阳性和阴性对照对产品进行滴定。

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样品示例及操作

  1. 按照说明书中的建议用目标抗体封闭和处理样品。
  2. 在样品中以适当的浓度和持续时间添加生物素偶联的二抗工作溶液。注意:请验证您的生物素偶联抗体与实验中使用的一抗的相容性和类型。例如,如果一抗是小鼠抗体,则与生物素结合的山羊抗小鼠抗体可用于该测定。
  3. 在室温下用链霉亲和素-Xtra 工作溶液孵育细胞30分钟至1小时。 注意:  孵育的时间需要仔细确定。
  4. 取出工作溶液,然后将细胞重悬在缓冲液中。
  5. 使用荧光显微镜拍摄图像或使用流式细胞仪记录强度。

 

图示

链霉亲和素-Xtra IF488缀合物

图1.用链霉亲和素-Xtra iFluor 缀合物和链霉亲和素Alexa Fluor 缀合物染色的Hela细胞图像对比。Hela细胞用4%多聚甲醛固定30分钟,用0.02%Triton X-100透化10分钟,并用1%BSA封闭1小时。然后将固定的Hela细胞在室温下用1 µg / mLα微管蛋白小鼠单克隆抗体染色1小时,然后用GxM IgG-生物素(货号16729)染色,然后用Streptavidin-Xtra iFluor 488和Streptavidin-Alexa Fluor 488染色.细胞核用Hoechst 33342(蓝色,货号17535)染色。

 

参考文献

Highly sensitive electrochemical biosensor for streptavidin detection based on CdSe quantum dots
Authors: Wei, Y. P., Liu, X. P., Mao, C. J., Niu, H. L., Song, J. M., Jin, B. K.
Journal: Biosens Bioelectron (2018): 99-103

Correction to Peptide Tag-Induced Horseradish Peroxidase-Mediated Preparation of a Streptavidin-Immobilized Redox-Sensitive Hydrogel
Authors: Mishina, M., Minamihata, K., Moriyama, K., Nagamune, T.
Journal: Biomacromolecules (2017): 311

Efficient streptavidin-functionalized nitrogen-doped graphene for the development of highly sensitive electrochemical immunosensor
Authors: Yang, Z., Lan, Q., Li, J., Wu, J., Tang, Y., Hu, X.
Journal: Biosens Bioelectron (2017): 312-318

High-sensitive surface plasmon resonance microRNA biosensor based on streptavidin functionalized gold nanorods-assisted signal amplification
Authors: Hao, K., He, Y., Lu, H., Pu, S., Zhang, Y., Dong, H., Zhang, X.
Journal: Anal Chim Acta (2017): 114-120

Biotin-Streptavidin Competition Mediates Sensitive Detection of Biomolecules in Enzyme Linked Immunosorbent Assay
Authors: Lakshmipriya, T., Gopinath, S. C., Tang, T. H.
Journal: PLoS One (2016): e0151153

DNA-based hybridization chain reaction and biotin-streptavidin signal amplification for sensitive detection of Escherichia coli O157:H7 through ELISA
Authors: Guo, Q., Han, J. J., Shan, S., Liu, D. F., Wu, S. S., Xiong, Y. H., Lai, W. H.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 990-995

Facile fabrication of an electrochemical aptasensor based on magnetic electrode by using streptavidin modified magnetic beads for sensitive and specific detection of Hg(2.)
Authors: Wu, D., Wang, Y., Zhang, Y., Ma, H., Pang, X., Hu, L., Du, B., Wei, Q.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 9-13

Highly Sensitive Two-Dimensional Paper Network Incorporating Biotin-Streptavidin for the Detection of Malaria
Authors: Grant, B. D., Smith, C. A., Karvonen, K., Richards-Kortum, R.
Journal: Anal Chem (2016): 2553-7

Increased electrocatalyzed performance through hairpin oligonucleotide aptamer-functionalized gold nanorods labels and graphene-streptavidin nanomatrix: Highly selective and sensitive electrochemical biosensor of carcinoembryonic antigen
Authors: Wen, W., Huang, J. Y., Bao, T., Zhou, J., Xia, H. X., Zhang, X. H., Wang, S. F., Zhao, Y. D.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 142-8

Peptide Tag-Induced Horseradish Peroxidase-Mediated Preparation of a Streptavidin-Immobilized Redox-Sensitive Hydrogel
Authors: Mishina, M., Minamihata, K., Moriyama, K., Nagamune, T.
Journal: Biomacromolecules (2016): 1978-84

链霉亲和素-Xtra IF555缀合物-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
链霉亲和素-Xtra IF555缀合物价格 1386
产品规格

100 ug

产品货号

链霉亲和素-Xtra IF555缀合物

产品参数
Ex (nm) 557 Em (nm) 570
分子量 ~52000 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

链霉亲和素缀合物广泛用于和生物素缀合物结合以检测多种生物靶标,例如蛋白质,核酸和其他分子。它们被用作许多生物检测的理想选择,例如免疫荧光显微镜,流式细胞术,蛋白质印迹和其他生物应用,因为链霉亲和素具有很强的亲和力结合生物素,在广泛的pH和温度范围内都不会受到影响。AAT Bioquest®提供多种标记有经典荧光染料的链霉亲和素偶联物(例如:FITC,TRITC,TexasRed®,Cy3®,Cy5®和Cy7®),以及我们优异的水溶性,光稳定性iFluor 和mFluor 染料。然而,常规的生物素-亲和素检测系统仍然受到现有荧光缀合物有限信号强度的限制。链霉亲和素Xtra iFluor缀合物是超亮链霉亲和素缀合物的新家族,其激发和发射性能与Alexa Fluor荧光团几乎相同,信号增强了3到5倍。它是在细胞成像或流式细胞仪中检测低丰度靶标的一组强大工具。iFluor 555是Cy3通道成像中常见的红色/橙色荧光色之一。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的链霉亲和素-Xtra IF555缀合物。

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 532nm
Em: 575/26nm
通道: PE通道

 


荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC滤波片组
Em: Cy3/TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
链霉亲和素-Xtra 储备溶液(1 mg / mL):加入100 uL的Cat#46002和1 mL的Cat#46003的ddH2O,制成1mg/mL的储备溶液。注意:此重组溶液在4°C储存并避光保存后,可稳定保存6个月而无明显变化。为了更长的存储时间,可以将重构的溶液分成单次使用的等分试样,或者不分装添加等体积的甘油(浓度为50%),然后将溶液存储在-20°C(避光)。

 

2.工作溶液配制

链霉亲和素-Xtra 工作溶液:对于IF,建议的染色浓度为1-5 ug / ml。对于FACS,建议在染色浓度为0.1-0.5 ug / 100 uL /百万细胞。注意: PBS + 0.1%BSA可用作染色缓冲液。 注意:为了获得每种应用的性能,需要仔细确定该试剂的浓度。注意:  建议的工作稀释度仅供参考,建议用户在测试中使用适当的阳性和阴性对照对产品进行滴定。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

  1. 按照说明书中的建议用目标抗体封闭和处理样品。
  2. 在样品中以适当的浓度和持续时间添加生物素偶联的二抗工作溶液。注意:请验证您的生物素偶联抗体与实验中使用的一抗的相容性和类型。例如,如果一抗是小鼠抗体,则与生物素结合的山羊抗小鼠抗体可用于该测定。
  3. 在室温下用链霉亲和素-Xtra 工作溶液孵育细胞30分钟至1小时。 注意:  孵育的时间需要仔细确定。
  4. 取出工作溶液,然后将细胞重悬在缓冲液中。
  5. 使用荧光显微镜拍摄图像或使用流式细胞仪记录强度。

链霉亲和素-Xtra IF555缀合物

图1.用链霉亲和素-Xtra iFluor 缀合物和链霉亲和素Alexa Fluor 缀合物染色的Hela细胞图像。Hela细胞用4%多聚甲醛固定30分钟,用0.02%Triton X-100透化10分钟,并用1%BSA封闭1小时。然后将固定的Hela细胞在室温下用1 µg / mLα微管蛋白小鼠单克隆抗体染色1小时,然后用GxM IgG-生物素(货号16729)染色,然后用Streptavidin-Xtra iFluor 555和Streptavidin-Alexa Fluor 555染色。细胞核用Hoechst 33342(蓝色,货号17535)染色。

 

参考文献

Highly sensitive electrochemical biosensor for streptavidin detection based on CdSe quantum dots
Authors: Wei, Y. P., Liu, X. P., Mao, C. J., Niu, H. L., Song, J. M., Jin, B. K.
Journal: Biosens Bioelectron (2018): 99-103

Correction to Peptide Tag-Induced Horseradish Peroxidase-Mediated Preparation of a Streptavidin-Immobilized Redox-Sensitive Hydrogel
Authors: Mishina, M., Minamihata, K., Moriyama, K., Nagamune, T.
Journal: Biomacromolecules (2017): 311

Efficient streptavidin-functionalized nitrogen-doped graphene for the development of highly sensitive electrochemical immunosensor
Authors: Yang, Z., Lan, Q., Li, J., Wu, J., Tang, Y., Hu, X.
Journal: Biosens Bioelectron (2017): 312-318

High-sensitive surface plasmon resonance microRNA biosensor based on streptavidin functionalized gold nanorods-assisted signal amplification
Authors: Hao, K., He, Y., Lu, H., Pu, S., Zhang, Y., Dong, H., Zhang, X.
Journal: Anal Chim Acta (2017): 114-120

Biotin-Streptavidin Competition Mediates Sensitive Detection of Biomolecules in Enzyme Linked Immunosorbent Assay
Authors: Lakshmipriya, T., Gopinath, S. C., Tang, T. H.
Journal: PLoS One (2016): e0151153

DNA-based hybridization chain reaction and biotin-streptavidin signal amplification for sensitive detection of Escherichia coli O157:H7 through ELISA
Authors: Guo, Q., Han, J. J., Shan, S., Liu, D. F., Wu, S. S., Xiong, Y. H., Lai, W. H.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 990-995

Facile fabrication of an electrochemical aptasensor based on magnetic electrode by using streptavidin modified magnetic beads for sensitive and specific detection of Hg(2.)
Authors: Wu, D., Wang, Y., Zhang, Y., Ma, H., Pang, X., Hu, L., Du, B., Wei, Q.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 9-13

Highly Sensitive Two-Dimensional Paper Network Incorporating Biotin-Streptavidin for the Detection of Malaria
Authors: Grant, B. D., Smith, C. A., Karvonen, K., Richards-Kortum, R.
Journal: Anal Chem (2016): 2553-7

Increased electrocatalyzed performance through hairpin oligonucleotide aptamer-functionalized gold nanorods labels and graphene-streptavidin nanomatrix: Highly selective and sensitive electrochemical biosensor of carcinoembryonic antigen
Authors: Wen, W., Huang, J. Y., Bao, T., Zhou, J., Xia, H. X., Zhang, X. H., Wang, S. F., Zhao, Y. D.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 142-8

Peptide Tag-Induced Horseradish Peroxidase-Mediated Preparation of a Streptavidin-Immobilized Redox-Sensitive Hydrogel
Authors: Mishina, M., Minamihata, K., Moriyama, K., Nagamune, T.
Journal: Biomacromolecules (2016): 1978-84

链霉亲和素-Xtra IF594缀合物-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
链霉亲和素-Xtra IF594缀合物价格 1386
产品规格

100 ug

产品货号

链霉亲和素-Xtra IF594缀合物

产品参数
Ex (nm) 568 Em (nm) 587
分子量 ~52000 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

链霉亲和素缀合物广泛用于和生物素缀合物结合以检测多种生物靶标,例如蛋白质,核酸和其他分子。它们被用作许多生物检测的理想选择,例如免疫荧光显微镜,流式细胞术,蛋白质印迹和其他生物应用,因为链霉亲和素具有很强的亲和力结合生物素,在广泛的pH和温度范围内都不会受到影响。AAT Bioquest®提供多种标记有经典荧光染料的链霉亲和素偶联物(例如:FITC,TRITC,TexasRed®,Cy3®,Cy5®和Cy7®),以及我们优异的水溶性,光稳定性iFluor 和mFluor 染料。然而,常规的生物素-亲和素检测系统仍然受到现有荧光缀合物有限信号强度的限制。链霉亲和素Xtra iFluor缀合物是超亮链霉亲和素缀合物的新家族,其激发和发射性能与Alexa Fluor荧光团几乎相同,信号增强了3到5倍。它是在细胞成像或流式细胞仪中检测低丰度靶标的一组强大工具。iFluor 594是Texas Red通道成像中常见的红色荧光色之一。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的链霉亲和素-Xtra IF594缀合物。

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 561nm
Em: 610/20nm
通道: PE-Texas Red通道

 


荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC滤波片组
Em: Cy3/TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
链霉亲和素-Xtra 储备溶液(1 mg / mL):加入100 uL的Cat#46004和1 mL的Cat#46005的ddH2O,制成1mg/mL的储备溶液。注意:此重组溶液在4°C储存并避光保存后,可稳定保存6个月而无明显变化。为了更长的存储时间,可以将重构的溶液分成单次使用的等分试样,或者不分装添加等体积的甘油(浓度为50%),然后将溶液存储在-20°C(避光)。

 

2.工作溶液配制

链霉亲和素-Xtra 工作溶液:对于IF,建议的染色浓度为1-5 ug / ml。对于FACS,建议在染色浓度为0.1-0.5 ug / 100 uL /百万细胞。注意: PBS + 0.1%BSA可用作染色缓冲液。 注意:为了获得每种应用的性能,需要仔细确定该试剂的浓度。注意:  建议的工作稀释度仅供参考,建议用户在测试中使用适当的阳性和阴性对照对产品进行滴定。

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样品示例及操作

  1. 按照说明书中的建议用目标抗体封闭和处理样品。
  2. 在样品中以适当的浓度和持续时间添加生物素偶联的二抗工作溶液。注意:请验证您的生物素偶联抗体与实验中使用的一抗的相容性和类型。例如,如果一抗是小鼠抗体,则与生物素结合的山羊抗小鼠抗体可用于该测定。
  3. 在室温下用链霉亲和素-Xtra 工作溶液孵育细胞30分钟至1小时。 注意:  孵育的时间需要仔细确定。
  4. 取出工作溶液,然后将细胞重悬在缓冲液中。
  5. 使用荧光显微镜拍摄图像或使用流式细胞仪记录强度。

链霉亲和素-Xtra IF594缀合物

图1.用链霉亲和素-Xtra iFluor 缀合物和链霉亲和素Alexa Fluor 缀合物染色的Hela细胞图像。Hela细胞用4%多聚甲醛固定30分钟,用0.02%Triton X-100透化10分钟,并用1%BSA封闭1小时。然后将固定的Hela细胞在室温下用1 µg / mLα微管蛋白小鼠单克隆抗体染色1小时,然后用GxM IgG-生物素(货号16729)染色,然后用Streptavidin-Xtra iFluor 594和Streptavidin-Alexa Fluor 594染色。细胞核用Hoechst 33342(蓝色,货号17535)染色。

 

参考文献

Highly sensitive electrochemical biosensor for streptavidin detection based on CdSe quantum dots
Authors: Wei, Y. P., Liu, X. P., Mao, C. J., Niu, H. L., Song, J. M., Jin, B. K.
Journal: Biosens Bioelectron (2018): 99-103

Correction to Peptide Tag-Induced Horseradish Peroxidase-Mediated Preparation of a Streptavidin-Immobilized Redox-Sensitive Hydrogel
Authors: Mishina, M., Minamihata, K., Moriyama, K., Nagamune, T.
Journal: Biomacromolecules (2017): 311

Efficient streptavidin-functionalized nitrogen-doped graphene for the development of highly sensitive electrochemical immunosensor
Authors: Yang, Z., Lan, Q., Li, J., Wu, J., Tang, Y., Hu, X.
Journal: Biosens Bioelectron (2017): 312-318

High-sensitive surface plasmon resonance microRNA biosensor based on streptavidin functionalized gold nanorods-assisted signal amplification
Authors: Hao, K., He, Y., Lu, H., Pu, S., Zhang, Y., Dong, H., Zhang, X.
Journal: Anal Chim Acta (2017): 114-120

Biotin-Streptavidin Competition Mediates Sensitive Detection of Biomolecules in Enzyme Linked Immunosorbent Assay
Authors: Lakshmipriya, T., Gopinath, S. C., Tang, T. H.
Journal: PLoS One (2016): e0151153

DNA-based hybridization chain reaction and biotin-streptavidin signal amplification for sensitive detection of Escherichia coli O157:H7 through ELISA
Authors: Guo, Q., Han, J. J., Shan, S., Liu, D. F., Wu, S. S., Xiong, Y. H., Lai, W. H.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 990-995

Facile fabrication of an electrochemical aptasensor based on magnetic electrode by using streptavidin modified magnetic beads for sensitive and specific detection of Hg(2.)
Authors: Wu, D., Wang, Y., Zhang, Y., Ma, H., Pang, X., Hu, L., Du, B., Wei, Q.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 9-13

Highly Sensitive Two-Dimensional Paper Network Incorporating Biotin-Streptavidin for the Detection of Malaria
Authors: Grant, B. D., Smith, C. A., Karvonen, K., Richards-Kortum, R.
Journal: Anal Chem (2016): 2553-7

Increased electrocatalyzed performance through hairpin oligonucleotide aptamer-functionalized gold nanorods labels and graphene-streptavidin nanomatrix: Highly selective and sensitive electrochemical biosensor of carcinoembryonic antigen
Authors: Wen, W., Huang, J. Y., Bao, T., Zhou, J., Xia, H. X., Zhang, X. H., Wang, S. F., Zhao, Y. D.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 142-8

Peptide Tag-Induced Horseradish Peroxidase-Mediated Preparation of a Streptavidin-Immobilized Redox-Sensitive Hydrogel
Authors: Mishina, M., Minamihata, K., Moriyama, K., Nagamune, T.
Journal: Biomacromolecules (2016): 1978-84

链霉亲和素-Xtra IF647缀合物-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
链霉亲和素-Xtra IF647缀合物价格 1386
产品规格

100 ug

产品货号

链霉亲和素-Xtra IF647缀合物

产品参数
Ex (nm) 656 Em (nm) 670
分子量 ~52000 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

链霉亲和素缀合物广泛用于和生物素缀合物结合以检测多种生物靶标,例如蛋白质,核酸和其他分子。它们被用作许多生物检测的理想选择,例如免疫荧光显微镜,流式细胞术,蛋白质印迹和其他生物应用,因为链霉亲和素具有很强的亲和力结合生物素,在广泛的pH和温度范围内都不会受到影响。AAT Bioquest®提供多种标记有经典荧光染料的链霉亲和素偶联物(例如:FITC,TRITC,TexasRed®,Cy3®,Cy5®和Cy7®),以及我们优异的水溶性,光稳定性iFluor 和mFluor 染料。然而,常规的生物素-亲和素检测系统仍然受到现有荧光缀合物有限信号强度的限制。链霉亲和素Xtra iFluor缀合物是超亮链霉亲和素缀合物的新家族,其激发和发射性能与Alexa Fluor荧光团几乎相同,信号增强了3到5倍。它是在细胞成像或流式细胞仪中检测低丰度靶标的一组强大工具。iFluor 647是Cy5通道成像中常见的深红色荧光色之一。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的链霉亲和素-Xtra IF647缀合物。

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 633nm
Em: 660/20nm
通道: APC通道

 


荧光显微镜  
Ex: Cy5 滤波片组
Em: Cy5 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案 

溶液配制

1.储备溶液配制

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
链霉亲和素-Xtra 储备溶液(1 mg / mL):加入100 uL的Cat#46006和1 mL的Cat#46007的ddH2O,制成1mg/mL的储备溶液。注意:此重组溶液在4°C储存并避光保存后,可稳定保存6个月而无明显变化。为了更长的存储时间,可以将重构的溶液分成单次使用的等分试样,或者不分装添加等体积的甘油(浓度为50%),然后将溶液存储在-20°C(避光)。

 

2.工作溶液配制

链霉亲和素-Xtra 工作溶液:对于IF,建议的染色浓度为1-5 ug / ml。对于FACS,建议在染色浓度为0.1-0.5 ug / 100 uL /百万细胞。注意: PBS + 0.1%BSA可用作染色缓冲液。 注意:为了获得每种应用的性能,需要仔细确定该试剂的浓度。注意:  建议的工作稀释度仅供参考,建议用户在测试中使用适当的阳性和阴性对照对产品进行滴定。

点击查看细胞制备方案

 

样品示例及操作

  1. 按照说明书中的建议用目标抗体封闭和处理样品。
  2. 在样品中以适当的浓度和持续时间添加生物素偶联的二抗工作溶液。注意:请验证您的生物素偶联抗体与实验中使用的一抗的相容性和类型。例如,如果一抗是小鼠抗体,则与生物素结合的山羊抗小鼠抗体可用于该测定。
  3. 在室温下用链霉亲和素-Xtra 工作溶液孵育细胞30分钟至1小时。 注意:  孵育的时间需要仔细确定。
  4. 取出工作溶液,然后将细胞重悬在缓冲液中。
  5. 使用荧光显微镜拍摄图像或使用流式细胞仪记录强度。

链霉亲和素-Xtra IF647缀合物

图1.用链霉亲和素-Xtra iFluor 缀合物和链霉亲和素Alexa Fluor 缀合物染色的Hela细胞图像。Hela细胞用4%多聚甲醛固定30分钟,用0.02%Triton X-100透化10分钟,并用1%BSA封闭1小时。然后将固定的Hela细胞在室温下用1 µg / mLα微管蛋白小鼠单克隆抗体染色1小时,然后用GxM IgG-生物素(货号16729)染色,然后用Streptavidin-Xtra iFluor 647和Streptavidin-Alexa Fluor 647染色。细胞核用Hoechst 33342(蓝色,货号17535)染色。

 

参考文献

Highly sensitive electrochemical biosensor for streptavidin detection based on CdSe quantum dots
Authors: Wei, Y. P., Liu, X. P., Mao, C. J., Niu, H. L., Song, J. M., Jin, B. K.
Journal: Biosens Bioelectron (2018): 99-103

Correction to Peptide Tag-Induced Horseradish Peroxidase-Mediated Preparation of a Streptavidin-Immobilized Redox-Sensitive Hydrogel
Authors: Mishina, M., Minamihata, K., Moriyama, K., Nagamune, T.
Journal: Biomacromolecules (2017): 311

Efficient streptavidin-functionalized nitrogen-doped graphene for the development of highly sensitive electrochemical immunosensor
Authors: Yang, Z., Lan, Q., Li, J., Wu, J., Tang, Y., Hu, X.
Journal: Biosens Bioelectron (2017): 312-318

High-sensitive surface plasmon resonance microRNA biosensor based on streptavidin functionalized gold nanorods-assisted signal amplification
Authors: Hao, K., He, Y., Lu, H., Pu, S., Zhang, Y., Dong, H., Zhang, X.
Journal: Anal Chim Acta (2017): 114-120

Biotin-Streptavidin Competition Mediates Sensitive Detection of Biomolecules in Enzyme Linked Immunosorbent Assay
Authors: Lakshmipriya, T., Gopinath, S. C., Tang, T. H.
Journal: PLoS One (2016): e0151153

DNA-based hybridization chain reaction and biotin-streptavidin signal amplification for sensitive detection of Escherichia coli O157:H7 through ELISA
Authors: Guo, Q., Han, J. J., Shan, S., Liu, D. F., Wu, S. S., Xiong, Y. H., Lai, W. H.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 990-995

Facile fabrication of an electrochemical aptasensor based on magnetic electrode by using streptavidin modified magnetic beads for sensitive and specific detection of Hg(2.)
Authors: Wu, D., Wang, Y., Zhang, Y., Ma, H., Pang, X., Hu, L., Du, B., Wei, Q.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 9-13

Highly Sensitive Two-Dimensional Paper Network Incorporating Biotin-Streptavidin for the Detection of Malaria
Authors: Grant, B. D., Smith, C. A., Karvonen, K., Richards-Kortum, R.
Journal: Anal Chem (2016): 2553-7

Increased electrocatalyzed performance through hairpin oligonucleotide aptamer-functionalized gold nanorods labels and graphene-streptavidin nanomatrix: Highly selective and sensitive electrochemical biosensor of carcinoembryonic antigen
Authors: Wen, W., Huang, J. Y., Bao, T., Zhou, J., Xia, H. X., Zhang, X. H., Wang, S. F., Zhao, Y. D.
Journal: Biosens Bioelectron (2016): 142-8

Peptide Tag-Induced Horseradish Peroxidase-Mediated Preparation of a Streptavidin-Immobilized Redox-Sensitive Hydrogel
Authors: Mishina, M., Minamihata, K., Moriyama, K., Nagamune, T.
Journal: Biomacromolecules (2016): 1978-84